[发明专利]改进的表观遗传免疫细胞计数方法在审
申请号: | 201880010392.6 | 申请日: | 2018-02-08 |
公开(公告)号: | CN110382713A | 公开(公告)日: | 2019-10-25 |
发明(设计)人: | 斯文·欧莱克 | 申请(专利权)人: | 艾皮恩蒂斯有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6881 |
代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人: | 王达佐;洪欣 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | 本发明涉及改进的表观遗传血液和免疫细胞计数方法以及各自的应用和试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 免疫细胞 遗传免疫 试剂盒 改进 遗传 血液 细胞 应用 | ||
【主权项】:
1.血液免疫细胞的定量甲基化测定方法,其包括以下步骤:a)提供确定量的人血液样品,其包含待定量的血液免疫细胞的二倍体基因组DNA;b)提供经计算机模拟的重亚硫酸盐转化的重组核酸,其包含至少一个脱甲基化标准基因和所述至少一个脱甲基化标准基因的所有CpG二核苷酸倒置为GpC的序列(“标准物I”);c)提供重组核酸,其包含b)所述的至少一个脱甲基化标准基因和b)所述的至少一个脱甲基化标准基因的所有CpG二核苷酸倒置为GpC的序列的脱甲基化的基因组序列(“校准物I”);d)提供重组核酸,其包含b)所述的至少一个脱甲基化标准基因的所有CpG二核苷酸倒置为GpC的序列(“标定物I”);e)向a)所述的样品添加确定量的d)所述的重组核酸(“加标”);f)利用重亚硫酸盐处理a)所述的待定量的细胞的二倍体基因组DNA以及c)和d)所述的重组核酸,以将未甲基化的胞嘧啶转化成尿嘧啶;g)使用适当的引物对扩增a)、b)、c)和f)所述的核酸分子,以产生扩增子;以及h)基于分析所述扩增子确定每体积样品的血液免疫细胞(BIC)。
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