[发明专利]一种急性分离大鼠乳鼠心肌细胞的方法在审
| 申请号： | 201811572638.7 | 申请日： | 2018-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN109576214A | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 徐林;范稣圳 | 申请（专利权）人： | 武汉大学人民医院（湖北省人民医院) |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人： | 张秋燕 |
| 地址： | 430060 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种急性分离大鼠乳鼠心肌细胞的方法，包括灌流液配制步骤、乳鼠主动脉逆行灌流步骤、心肌组织的分离步骤；其特征在于通过针头的连接使得胶原酶液持续地经主动脉‑冠脉系统充分灌流至心肌组织。本发明将胶原酶液经主动脉‑冠脉系统灌流至心肌组织，相较于大多科研人员所采用组织‑酶消化法来分离大鼠乳鼠心肌细胞，本法所获得的心肌细胞存活率高，细胞状态好，分离后不仅能进行原代心肌细胞培养，还能即刻进行膜片钳、单细胞染色和共聚焦显微镜成像、活细胞工作站动态观察与参数分析等后续实验操作，而传统的组织‑酶消化法若进行上述膜片钳等实验操作需将分离获得的细胞纯化和培养48小时以上心肌细胞恢复其原有形态后方可进行。 | ||
| 搜索关键词： | 乳鼠心肌细胞 心肌组织 主动脉 大鼠 灌流 急性分离 胶原酶液 酶消化法 实验操作 心肌细胞 膜片钳 冠脉 共聚焦显微镜 活细胞工作站 原代心肌细胞 参数分析 动态观察 分离步骤 细胞纯化 细胞状态 存活率 逆行 传统的 灌流液 染色 地经 乳鼠 针头 成像 配制 科研 恢复 | ||
【主权项】：
1.一种急性分离大鼠乳鼠心肌细胞的方法，其特征在于它包括灌流液配制步骤、乳鼠主动脉逆行灌流步骤、心肌组织的分离步骤；其特征在于通过针头的连接使得胶原酶液经主动脉‑冠脉系统充分灌流至心肌组织，且灌流液体流速均匀、持续且不超过2mL/min。
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