[发明专利]一种醇脱氢酶突变体及其在辅酶再生中的应用在审
申请号: | 201811277370.4 | 申请日: | 2018-10-30 |
公开(公告)号: | CN109402076A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 倪晔;朱诚;许国超;周婕妤 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/22;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其在辅酶再生中的应用,属于酶工程以及生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的醇脱氢酶的第84位缬氨酸和/或第127位酪氨酸进行突变得到的;此醇脱氢酶突变体对多种醇类辅底物(如1,4‑丁二醇、1,5‑戊二醇、1,6‑己二醇)均具有较高的活力,可以催化这些醇类辅底物进行辅酶NADPH再生;且与野生型醇脱氢酶KpADH相比,其活性、催化效率更高,对辅底物1,4‑丁二醇的kcat值最高可达75.9min‑1,是野生型KpADH的7.3倍,kcat/Km值可达2009min–1·M–1,是野生型KpADH的14.7倍,Km值最低可为11.3mM,较野生型醇脱氢酶KpADH有了显著的降低,因此,本发明的醇脱氢酶突变体具有更高的工业应用价值。 | ||
搜索关键词: | 醇脱氢酶 突变体 野生型 底物 辅酶再生 丁二醇 醇类 生物工程技术领域 氨基酸序列 辅酶NADPH 催化效率 工业应用 己二醇 酪氨酸 酶工程 戊二醇 缬氨酸 催化 突变 应用 再生 | ||
【主权项】:
1.一种醇脱氢酶的突变体,其特征在于,所述突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的醇脱氢酶的第84位缬氨酸和/或第127位酪氨酸进行突变得到的。
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