[发明专利]一种罗非鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法

摘要

本发明属于免疫调节肽技术领域。本发明公开了一种罗非鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其包括鱼鳞预处理、鱼鳞粉碎、鱼鳞脱钙、鱼鳞脱脂、鱼鳞酶解和后处理等步骤。本发明通过对加工过程中废弃的罗非鱼鱼鳞进行深加工高效地获得了一种具有显著免疫调控效果的免疫调节肽，其能够适用于慢性或预防性用途，也能够适用于广大人群，能够降低用药成本。

主权项

1.一种罗非鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：a）鱼鳞预处理：取罗非鱼鱼鳞依次用无水乙醇和水清洗，然后在0.1～0.15mol/L的盐酸中浸泡1～2小时，之后沥干；b）鱼鳞粉碎：将经上述处理的罗非鱼鱼鳞用水清洗至中性，然后粉碎至的鱼鳞浆；c）鱼鳞脱钙：向鱼鳞浆中加入0.5～1.5mol/L的柠檬酸溶液并使液面没过鱼鳞浆，充分搅拌处理4～6小时，然后过滤分离得到固含物，并将固含物用水清洗1～3次后沥干，然后向固含物中加入固含物重量1～1.5倍0.15～0.20mol/L的EDTA溶液，在35～40℃下搅拌处理1～2小时，之后过滤并清洗沥干制得脱钙鱼鳞；d）鱼鳞脱脂：向脱钙鱼鳞中加入脱钙鱼鳞重量0.5～0.8倍异丙醇，搅拌脱脂处理20～24小时，然后用水清洗至无异丙醇味，接着用1～2mol/L的氢氧化钠溶液浸泡20～24小时，用水清洗至中性后制得预处理鱼鳞；e）鱼鳞酶解：按蛋白酶的量为1500～2000U/g，料液比为1：（10～15）配制鱼鳞酶解液，在40～50℃下酶解5～7小时，制得酶解鱼鳞；f）后处理：将酶解鱼鳞在沸水中灭酶10～15min，冷却至室温后，在3～5℃，10000～14000rpm条件下离心处理15～20分钟，收集上清液，冷冻干燥制得罗非鱼鱼鳞免疫调节肽。