[发明专利]一种连续体积梯度毛细管数字PCR方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201811256687.X | 申请日： | 2018-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN109337963B | 公开（公告）日： | 2022-04-19 |
| 发明（设计）人： | 李孝锦;康焰 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 一种连续体积梯度毛细管数字PCR方法，它包含以下步骤：将含荧光基团的PCR反应体系和与水等密度油相按照1∶(2～4)的体积比混匀，置入内径由大到小连续变化的毛细管中进行PCR反应，光学信号采集设备下统计阳性微滴占比25％～55％区域的微滴数和微滴半径，计算PCR模板拷贝数。本发明可以降低数字PCR的成本、并简化其操作过程。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 连续 体积 梯度 毛细管 数字 pcr 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种连续体积梯度毛细管数字PCR方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)将含荧光基团的PCR反应体系和油相按照1∶(2～4)的体积比震荡混匀，置入内径由大到小连续变化的毛细管中，封闭毛细管两端；所述油相密度等于水的密度；(2)加热使油相和水相沿毛细管径向交替分布；(3)进行PCR反应，荧光信号采集设备下统计阳性微滴占比25％～55％区域的微滴数和微滴半径，计算PCR模板拷贝数；优选统计阳性微滴占比30％～50％区域。
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