[发明专利]快速制备可直接使用的gRNA表达载体的方法及其应用有效
| 申请号： | 201811205040.4 | 申请日： | 2018-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN111057717B | 公开（公告）日： | 2022-12-23 |
| 发明（设计）人： | 向熙;罗永伦;李聪慧;窦红伟 | 申请（专利权）人： | 青岛华大基因研究院 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66;C12N15/90 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 赵天月 |
| 地址： | 266510 山东省青岛市黄岛*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种快速制备可直接使用的gRNA表达载体的方法及其应用。该方法包括将待连接退火gRNA和骨架载体进行连接反应，以便获得含有所述gRNA表达载体的连接产物，其中，所述连接反应的反应体系中含有：大于5ng/微升同时不大于250ng/微升的所述骨架载体，其中，所述骨架载体相对于所述待连接退火gRNA是过量的。发明人尝试扩大连接体系中骨架载体的用量，使得骨架载体相对于所述待连接退火gRNA是过量的，发明人发现，大幅提高骨架载体的用量，可以大大增加连接产物中环状gRNA表达载体的得率，缩短载体构建所用时间及成本，并且不影响基因编辑效率。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 制备 直接 使用 grna 表达 载体 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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