[发明专利]一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母菌株有效

专利信息
申请号: 201811172714.5 申请日: 2018-10-09
公开(公告)号: CN108949603B 公开(公告)日: 2020-08-04
发明(设计)人: 康振;黄浩;堵国成;王阳 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N1/19 分类号: C12N1/19;C12N15/81;C12N15/66;C12R1/865
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母菌株,属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将来源于Capitella teleta的透明质酸水解酶基因克隆连接到酿酒酵母整合表达载体pRS305,通过将启动子置换,添加信号肽,在基因N端添加氨基酸短肽等手段,获得质粒pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase,并转化酿酒酵母宿主S.cerevisiae CEN.PK2‑1C,从而构建高产透明质酸水解酶的重组菌株命名为S.cerevisiae CEN.PK2‑1C‑pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase。在3L罐中,重组S.cerevisiae菌株胞外表达的透明质酸水解酶的活力可达1.26×106U/mL,相比重组菌株S.cerevisiae pRS305‑HAase的胞内酶活2.05×105U/mL,提高了5.1倍。本发明利用酿酒酵母为宿主发酵得到的透明质酸水解酶对透明质酸具有高选择性和高活力,具有重要的应用前景。
搜索关键词: 一种 分泌 表达 蠕虫 透明 水解 重组 酿酒 酵母 菌株
【主权项】:
1.一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母,其特征在于,是将来源于海蠕虫(Capitella teleta)的透明质酸水解酶基因转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中得到的基因工程菌;将缺失了TEF1启动子的pRS305、启动子GAP(m)、信号肽sp23、6个谷氨酰胺短肽和透明质酸水解酶基因连接成环,构成重组表达载体。
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