[发明专利]一种定位基因组DNA上损伤和修饰位点的方法有效
| 申请号： | 201811145591.6 | 申请日： | 2018-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN109266728B | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 曹博 | 申请（专利权）人： | 曲阜师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 273165 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种定位基因组DNA上损伤和修饰位点的方法，首先将DNA样品的损伤或修饰位点转化为断裂位点；然后加入硫代核苷酸和DNA聚合酶I进行切口平移；终止反应后获得的样品中加入对磷硫酰化修饰DNA敏感核酸酶消化模板；最后将获得的磷硫酰化修饰DNA测序，所得序列的5'端即为原损伤或者修饰位点。本发明提供的方法，填补了国内外现有技术无法精确定位基因组DNA上损伤位点的空白，能够实现对不同长度和不同来源的DNA样品进行损伤和修饰位点定量和定位分析，使用简便，易于操作，而且对样品无特殊要求，准确率高、检测背景影响低、分辨率高。 | ||
| 搜索关键词： | 位点 修饰 损伤 基因组DNA 磷硫 酰化 核酸酶消化 背景影响 平移 核苷酸 分辨率 准确率 硫代 断裂 填补 敏感 检测 转化 分析 | ||
【主权项】：
1.一种非疾病诊断和治疗目的的定位基因组DNA上损伤和修饰位点的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将DNA样品的损伤或修饰位点转化为断裂位点；（2）步骤（1）获得样品加入硫代核苷酸和DNA聚合酶I进行切口平移；（3）将步骤（2）终止反应后获得的样品中加入对磷硫酰化修饰DNA敏感的核酸外切酶消化模板；（4）对步骤（3）中的DNA序列测序，所得序列的5'端即为原损伤或者修饰位点。
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