[发明专利]检测大肠杆菌含量的试剂盒、特异性引物和探针及应用在审

专利信息
申请号: 201811108227.2 申请日: 2018-09-21
公开(公告)号: CN109055587A 公开(公告)日: 2018-12-21
发明(设计)人: 安志远;周怀谷;李发院;柳勇;赵鹏;郭育林;夏子芳;郑卫国 申请(专利权)人: 上海公安学院;上海市刑事科学技术研究院;无锡中德美联生物技术有限公司
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/10;C12Q1/06;C12N15/11
代理公司: 苏州国诚专利代理有限公司 32293 代理人: 李思睿
地址: 200137 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明提供了一种一组大肠杆菌特异性引物和探针序列,从而建立一种能应用于大鼠死后心血中大肠杆菌含量检测的快速、灵敏、特异性好的荧光定量PCR检测的方法。根据本发明的一方面,提供了一种用于检测大肠杆菌的特异性引物和探针,特异性引物和探针以保守片段序列为靶目标。本发明采用基因克隆技术,将大肠杆菌LacZ基因特异性片段插入到载体pMD18‑T中,获得含有LacZ基因特异性片段的重组质粒,以此作为标准品。根据大肠杆菌LacZ基因特异性片段序列设计并合成一组特异性引物和探针,优化PCR反应条件,建立以实时荧光定量聚合酶链反应为平台的检测方法,并对所建立的方法进行评估。
搜索关键词: 特异性引物 大肠杆菌 探针 特异性片段 大肠杆菌LacZ基因 检测 实时荧光定量聚合酶链反应 荧光定量PCR检测 基因克隆技术 保守片段 含量检测 探针序列 序列设计 重组质粒 靶目标 标准品 试剂盒 大鼠 灵敏 应用 合成 评估 优化
【主权项】:
1.用于检测大肠杆菌的特异性引物和探针,其特征在于:所述特异性引物和探针以保守片段序列内序列为靶目标,所述保守片段序列为SEQ No.1。
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