[发明专利]一种单子叶植物miRNA高效过表达载体的构建方法有效
| 申请号： | 201811093478.8 | 申请日： | 2018-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN109161558B | 公开（公告）日： | 2022-05-06 |
| 发明（设计）人： | 唐贵良;杨晓玉;李琳;罗淋淋;刘琳;罗光宇 | 申请（专利权）人： | 深圳大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66 |
| 代理公司： | 深圳市韦恩肯知识产权代理有限公司 44375 | 代理人： | 李玉平 |
| 地址： | 518054 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，公开了一种单子叶植物miRNA高效过表达载体的构建方法,包括以下步骤：S1,针对目标miRNA,制备与之对应的连接序列；S2,将S1所述连接序列克隆至克隆载体，以获得启动子‑连接序列‑终止子结构；S3，将用于过表达目标miRNA的茎环结构,导入到S2所述启动子‑连接序列‑终止子结构，以使其具有至少两所述茎环结构；S4，通过双酶切的方式将S3所得的启动子‑连接序列‑终止子结构克隆至双元载体。本发明连接效率高，操作简便易行，并可避免引入不必要的转基因成分，利于单子叶植物miRNA的功能研究，更有利于后续转基因植株的表型观察和结果解释。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 单子叶植物 mirna 高效 表达 载体 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种单子叶植物miRNA高效过表达载体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤：S1,针对目标miRNA,制备与之对应的连接序列；S2,将S1所述连接序列克隆至克隆载体，以获得启动子‑连接序列‑终止子结构；S3，将用于过表达目标miRNA的茎环结构,导入到S2所述启动子‑连接序列‑终止子结构，以使其具有至少两所述茎环结构；S4，通过双酶切的方式将S3所得的启动子‑连接序列‑终止子结构克隆至双元载体。
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