[发明专利]一种利用模拟移动床分离D-果糖和D-阿洛酮糖的方法

摘要

本发明公开了一种利用模拟移动床分离D‑果糖和D‑阿洛酮糖的方法，包括以下步骤：(1)D‑阿洛酮糖的转化：将D‑果糖经固定化D‑阿洛酮糖差向异构酶纳米微球转化成D‑阿洛酮糖，得到混合糖液；(2)混合糖液的预处理：将混合糖液进行脱色预处理；(3)顺序式模拟移动床分离：将预处理后的混合糖液按照顺序式模拟移动床的特定分离参数进行分离，最终分离得到的D‑阿洛酮糖溶液的纯度≧99％，回收率≧95％，最后分离得到的D‑果糖溶液的纯度≧99％，回收率≧90％。总之，本发明具有分离产品纯度及回收率高，采用顺序式模拟移动床代替传统模拟床，减少了色谱柱使用数量，降低了生产成本。

主权项

1.一种利用模拟移动床分离D‑果糖和D‑阿洛酮糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)D‑阿洛酮糖的转化：将D‑果糖经固定化D‑阿洛酮糖差向异构酶纳米微球转化成D‑阿洛酮糖，得到D‑果糖和D‑阿洛酮糖的混合糖液；(2)混合糖液的预处理：将D‑果糖和D‑阿洛酮糖的混合液加水稀释至糖度为5％‑10％，用0.45μm滤膜真空抽滤除杂，再经颗粒碳色谱柱进行脱色预处理，得到混合糖液原料；(3)顺序式模拟移动床分离：将所述预处理后的混合糖液通过顺序式模拟移动床色谱设备进行分离，所述设备由一个具有12个入口，13个出口的旋转阀分配、8根环状连接的吸附分离柱和4台恒流柱塞计量泵组成，设备为间歇进料，流动相逆时针旋转，固定相模拟顺时针旋转，通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到D‑果糖溶液和D‑阿洛酮糖溶液的分离糖液，每根色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：S1：精馏阶段，由8根柱串联运行，流向：D口→CC口，去离子水作为解析剂经D口进入第7根柱中，再注入第6根柱中，再注入第5根柱中，依次循环至从第2根柱底部的CC口流出，使得D‑果糖和D‑阿洛酮糖两个组分在6柱中分离展开其中，控制流速为1.5‑2.0ml/min，时间为305‑320s，体积为9.24‑9.56ml；S2：解析阶段，由第3‑7根柱串联运行，料液流向：D口→B口，去离子水作为解析剂经D口进入第7根柱中，D‑果糖和D‑阿洛酮糖两个组分会在5柱中进一步分离展开，当循环至第3根柱子时，由于D‑果糖跟柱子中的树脂吸附能力较弱，会随着解析剂从第3根柱底部的B口流出，而吸附能力较强的D‑阿洛酮糖仍然留在柱子中；其中，控制流速为1.5‑2.0ml/min，时间为305‑320s，体积为9.24‑9.56ml；S3：产物提取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；产物提取阶段，由第7根柱进行单柱运行，料液流向：D口→A口，去离子水作为洗脱剂经D口进入第7根柱中，再由第7根柱底部的A口排出吸附较强的D‑阿洛酮糖溶液，其中，控制流速为1.5‑2.0ml/min，时间为415‑425s，体积为12.43‑12.64ml；进料阶段，由第2根和第3根进行双柱串联运行，料液流向：F口→B口，混合糖液原料经F口进入第3根柱中，第2根柱底部的B口排出吸附较弱的D‑果糖溶液，其中，控制流速为0.8‑1.0ml/min，时间为415‑425s，体积为6.24‑6.32ml；固定相模拟顺时针旋转，直至8根色谱柱全部轮换一个周，即完成一个周期，重复几个周期直至分离过程达到稳态，分别得到D‑果糖溶液和D‑阿洛酮糖溶液的分离糖液；(4)将D‑果糖溶液和D‑阿洛酮糖溶液的分离糖液分别收集起来，45℃真空旋转蒸发，使其浓缩至80％的糖度，冷冻干燥，4摄氏度冰箱储存。