[发明专利]一种特异性识别蛋白A的多克隆抗体及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201811000557.X | 申请日： | 2018-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN109182364A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 吴刚;谢胜平;易红波 | 申请（专利权）人： | 武汉百意欣生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K16/12;G01N33/68 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物科学和检测试剂技术领域，更具体地，涉及一种特异性识别蛋白A的多克隆抗体及其制备方法和应用。该方法首先通过对蛋白A的抗原表位分析，把可产生较强免疫原性位点的基因片段选择合适的引物进行扩增，并采用该位点的氨基酸序列制备重组蛋白片段，用此片段免疫动物得到特异性针对该位点的抗体。在重组蛋白制备中采用大肠杆菌表达系统，能很好的保证重组蛋白的表达，表达产量高，有利于大批量的制备特异性识别蛋白A的多克隆抗体。本发明制备的特异性识别蛋白A的多克隆抗体可应用于定量检测试验样品中Protein A的残留水平，同时也便于Protein A纯化介质制造商监测特定条件下Protein A的脱落特征。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白A 多克隆抗体 位点 制备 制备方法和应用 特异性识别 种特异性 重组蛋白 大肠杆菌表达系统 抗原表位分析 制备重组蛋白 氨基酸序列 介质制造商 强免疫原性 定量检测 基因片段 检测试剂 免疫动物 生物科学 试验样品 抗体 扩增 引物 残留 监测 应用 保证 | ||
【主权项】：
1.一种特异性识别蛋白A的多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)蛋白A抗原表位分析：通过抗原表位分析选择目的片段用作蛋白A的重组表达，所述目的片段的基因序列如序列表中SEQ ID NO.1所示；(2)将选定的目的片段的DNA通过PCR扩增后插入到表达载体构建含有如SEQ ID No.1所示核苷酸序列的重组表达载体，将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得重组蛋白A抗原；(3)将所述重组蛋白A抗原免疫动物，经血清分离纯化获得特异性识别蛋白A的多克隆抗体。
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