[发明专利]一种鉴别新疆额尔齐斯河北方须鳅隐存种的分子生物学方法在审
| 申请号： | 201810990342.0 | 申请日： | 2018-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN109055515A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 杨天燕;孟玮;高天翔 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鉴别新疆额尔齐斯河北方须鳅隐存种的分子生物学方法，包括如下步骤：1)采用酚‑氯仿法分别提取北方须鳅组织的基因组DNA；2)设计线粒体COI基因的引物；3)以两种鱼的DNA为模板，进行PCR扩增；4)PCR产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测，挑选条带清晰的PCR产物进行测序；5)采用Mega6.0软件计算得到北方须鳅与其隐存种之间的K2P遗传距离，基于K2P遗传距离构建邻接系统关系树，且对获得的序列进行比对。有益效果为：本发明分子生物学方法科学有效、简单快捷、准确可行，特异性强、可信度高，不用处死北方须鳅，能够一次性对物种同时进行扩增，具有高效快速和便捷的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 分子生物学 北方 遗传距离 鉴别 琼脂糖凝胶电泳检测 线粒体COI基因 基因组DNA 高效快速 邻接系统 软件计算 特异性强 关系树 可信度 氯仿法 一次性 比对 测序 构建 扩增 条带 引物 物种 清晰 | ||
【主权项】：
1.一种鉴别新疆额尔齐斯河北方须鳅隐存种的分子生物学方法，其特征在于：包括如下步骤：1)采用酚‑氯仿法分别提取北方须鳅组织的基因组DNA；2)设计线粒体COI基因的引物；3)以两种鱼的DNA为模板，进行PCR扩增；4)PCR产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测，挑选条带清晰的PCR产物进行测序；5)计算得到北方须鳅与其隐存种之间的K2P遗传距离，基于K2P遗传距离构建邻接系统关系树，且对获得的序列进行比对。
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