[发明专利]一种快速分离植物叶片角质层的方法在审
| 申请号： | 201810967879.5 | 申请日： | 2018-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN108977406A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 林金星;何丽娜;吴鸿洋 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100083 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种快速分离植物叶片角质层的方法，本发明属于生物技术领域，具体涉及一种分离植物叶片角质层领域。本发明的快速分离植物叶片角质层的方法按以下步骤进行：一、表皮的撕取；二、角质层内表面的定位；三、叶肉细胞的去除：首先配制酶解液，将步骤二中得到的定位表皮结构加入到上述酶解液中进行酶解反应，并且保证所述的定位表皮结构的内表面向上放置，酶解温度为23℃‑27℃，酶解时间为2h‑4h；四、角质层内表面的清洗得到清洗样品；五、样品的干燥：将步骤四得到的样品进行干燥，得到分离的角质层结构。通过本发明的方法分离植物叶片角质层具有操作快速、简便、酶解效率高并且分离效果好的优势。 | ||
| 搜索关键词： | 角质层 快速分离 植物叶片 内表面 表皮结构 分离植物 酶解液 酶解 叶片 清洗 生物技术领域 分离效果 酶解反应 酶解效率 叶肉细胞 表皮 撕取 去除 配制 保证 | ||
【主权项】：
1.一种快速分离植物叶片角质层的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：一、表皮的撕取：选取新鲜嫩绿的植物叶子，用镊子撕取叶子的表皮；二、角质层内表面的定位：将步骤一撕取的表皮的上下表面利用尼龙膜覆盖，将表皮的内表面向上放置，得到定位表皮结构；三、叶肉细胞的去除：首先配制酶解液，按重量分数分别称取0.5％‑3％的纤维素酶、0.005％‑0.015％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％‑3％的牛血清白蛋白和50％‑60％的渗透缓冲液倒入培养皿中，混合得到酶解液，所述的酶解液pH为5‑6；将步骤二中得到的定位表皮结构加入到上述酶解液中进行酶解反应，并且保证所述的定位表皮结构的内表面向上放置，酶解温度为23℃‑27℃，酶解时间为2h‑4h；四、角质层内表面的清洗：用镊子夹住步骤三得到酶解后的定位表皮结构的尼龙膜，然后利用渗透缓冲液清洗数次，直至清洗溶液变成无色，得到清洗样品；五、样品的干燥：将步骤四得到的样品进行干燥，得到分离的角质层结构。
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