[发明专利]一种具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的鲎血蛋白水解肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的鲎血蛋白水解肽的制备方法。本发明是以制备鲎试剂残留的废血细胞组织为原料，通过碱性蛋白酶酶解，冷冻离心得鲎血蛋白活性肽。本发明采用碱性蛋白酶酶解，酶种单一不复杂，且只需在一定的pH、温度和浓度条件下，将酶液与样品混合进行制备，操作条件温和，步骤不繁琐，生产效率高；本发明获得鲎血蛋白活性肽是一种生物蛋白水解肽，易吸收，无副作用，不仅能有效抑制α‑葡萄糖苷酶还可以清除羟自由基，可应用于制备糖尿病的药物和辅助治疗药物；本发明方法解决了生产废料的再利用问题，不仅提高原料利用率、还扩大了鲎血的应用范围。

主权项

1.一种具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的鲎血蛋白水解肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将鲎血血细胞置于低温下冷冻，然后在4℃融化，反复三次；在4℃下磁力搅拌5‑10min，使鲎血细胞破裂；（2）将步骤（1）处理后的鲎血血细胞低温离心，离心转速4000‑5000r/min，收集固体沉淀，并用蒸馏水冲洗，即得到鲎血细胞组织；（3）用碱性蛋白酶酶解鲎血细胞组织，酶解条件：pH 9.0‑11.0，酶解温度48‑58℃，酶浓度 1.5‑2.5mg/mL，底物浓度5.0‑7.0mg/mL，酶解时间4‑6h，得酶解液；（4）将酶解液置于低温冷冻离心机中，离心分离，得上清液，冷冻干燥上清液，获得鲎血细胞蛋白水解肽。