[发明专利]基于CRISPR-Cas9的基因组无痕编辑的载体与应用有效
| 申请号： | 201810809209.0 | 申请日： | 2018-07-21 |
| 公开（公告）号： | CN109722436B | 公开（公告）日： | 2020-09-01 |
| 发明（设计）人： | 汪俊卿;修翔;王瑞明;范翰;李丕武;苏静;薛乐;张丽华;王松江;王建彬;郭传庄;隋松森 | 申请（专利权）人： | 齐鲁工业大学;诸城东晓生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/63;C12N15/90 |
| 代理公司： | 济南竹森知识产权代理事务所(普通合伙) 37270 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 250353 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及基于CRISPR‑Cas9的热带假丝酵母基因组无痕编辑的载体与应用。一种基于CRISPR‑Cas9的热带假丝酵母基因组无痕编辑的载体，结构为同源臂、sgRNA基因、启动子pGAL、Cas9、正向筛选标记、原核生物的复制起始位点六个组件顺次连接组成环形载体。本发明所构建质粒中的Cas9基因具有作为基因编辑和反向筛选标记的双重功能，因而Cas9经诱导发挥作用时，Cas9蛋白即会识别基因组上的靶向基因，也会识别载体中的同源臂基因，进而在实现靶向基因编辑的同时，亦可以将整个载体从目标菌株中进行切除，达到无痕敲除的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 crispr cas9 基因组 编辑 载体 应用 | ||
【主权项】：
1.Cas9基因作为基因编辑和反向筛选标记双重功能组件，在基于CRISPR‑Cas9的热带假丝酵母基因组无痕编辑中的应用。
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