[发明专利]一种共表达L-乳酸氧化酶和过氧化氢酶偶联生产丙酮酸钠的方法在审
| 申请号： | 201810629658.7 | 申请日： | 2018-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN108841878A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 王苓;李晚军;刘超;曾帅;刘鑫;杨顺楷;陈纹锐 | 申请（专利权）人： | 四川同晟生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C12P7/40 | 分类号： | C12P7/40;C12N15/70;C12N15/66;C12N15/53;C12R1/19 |
| 代理公司： | 成都弘毅天承知识产权代理有限公司 51230 | 代理人： | 白小明 |
| 地址： | 618000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明属于酶催化技术领域，具体涉及一种共表达L‑乳酸氧化酶和过氧化氢酶偶联生产丙酮酸钠的方法。针对现有的丙酮酸的合成方法中酶法转化法的成本较高而不适于工业化的问题，本发明的技术方案是：[1]构建L‑乳酸氧化酶和过氧化氢酶共表达载体，转化到大肠杆菌中；[2]将步骤[1]得到大肠杆菌高密度发酵的获得L‑乳酸氧化酶和过氧化氢酶共表达的大肠杆菌工程菌；[3]将步骤[2]得到的大肠杆菌工程菌的湿菌体投入L‑乳酸钠溶液中，通无菌空气搅拌转化，得到转化液；[4]将步骤[3]得到的转化液通过微虑超滤除去菌体及蛋白，通过除杂和醇沉得到丙酮酸钠。本发明适用于丙酮酸钠的工业生产。 | ||
| 搜索关键词： | 过氧化氢酶 乳酸氧化酶 共表达 大肠杆菌工程菌 大肠杆菌 生产丙酮酸 丙酮酸钠 转化液 偶联 高密度发酵 共表达载体 乳酸钠溶液 酶法转化 无菌空气 丙酮酸 酶催化 湿菌体 超滤 醇沉 构建 菌体 转化 蛋白 合成 | ||
【主权项】：
1.一种共表达L‑乳酸氧化酶和过氧化氢酶偶联生产丙酮酸钠的方法，其特征在于，包括如下步骤：[1]构建L‑乳酸氧化酶和过氧化氢酶共表达载体，转化到大肠杆菌中；[2]将步骤[1]得到的大肠杆菌进行高密度发酵；[3]将步骤[2]高密度发酵后的大肠杆菌的湿菌体投入L‑乳酸钠溶液中，通无菌空气搅拌转化，得到转化液；[4]除去步骤[3]得到的转化液中的菌体及蛋白，通过除杂和醇沉得到丙酮酸钠。
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