[发明专利]检测端粒长度的方法有效
申请号: | 201810482515.8 | 申请日: | 2018-05-18 |
公开(公告)号: | CN108486221B | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 颜晓梅;周颖星;高恺旻 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | C12Q1/6816 | 分类号: | C12Q1/6816 |
代理公司: | 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙) 11447 | 代理人: | 苏瑞;耿超 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本公开涉及一种检测端粒长度的方法,该方法包括以下步骤:S1.对待测细胞样本进行预处理,得到待测细胞样本的M期染色体悬液;S2.将所述染色体悬液离心并去除上清,得到含有M期染色体的第一沉淀,将所述第一沉淀与含有端粒特异肽核酸荧光探针的杂交液混合,进行变性并杂交,得到含有杂交染色体的悬浮液;S3.将所述杂交染色体悬浮液进行洗涤、离心并去除上清,得到含有杂交染色体的第二沉淀,将所述第二沉淀用悬浮介质悬浮,得到检测上样悬浮液;S4.使用超高灵敏流式细胞术对所述检测上样悬浮液中的染色体的荧光信号在单颗粒水平进行逐一检测。该方法能够实现对单染色体水平的人类端粒长度及短端粒比率的快速、精确、定量检测。 | ||
搜索关键词: | 检测 端粒 长度 方法 | ||
【主权项】:
1.一种检测端粒长度的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:S1.对待测细胞样本进行预处理,得到待测细胞样本的M期染色体悬液;S2.将所述染色体悬液离心并去除上清,得到含有M期染色体的第一沉淀,将所述第一沉淀与含有端粒特异肽核酸荧光探针的杂交液混合,进行变性并杂交,得到含有杂交染色体的悬浮液;S3.将所述杂交染色体悬浮液进行洗涤、离心并去除上清,得到含有杂交染色体的第二沉淀,将所述第二沉淀用悬浮介质悬浮,得到检测上样悬浮液;S4.使用超高灵敏流式细胞术对所述检测上样悬浮液中的染色体的荧光信号在单颗粒水平进行逐一检测,根据所述检测上样悬浮液中的染色体的荧光信号的强度计算所述待测细胞样本的单个染色体水平的端粒长度以及所述待测细胞样本的端粒长度分布。
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