[发明专利]一种发酵虫草菌粉及其制剂中多糖含量的检测方法在审
申请号: | 201810236763.4 | 申请日: | 2018-03-21 |
公开(公告)号: | CN108490091A | 公开(公告)日: | 2018-09-04 |
发明(设计)人: | 陈丽华;管咏梅;朱卫丰;杨明;金晨;刘小林 | 申请(专利权)人: | 江西国药有限责任公司;江西中医药大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人: | 王为;孟旭 |
地址: | 330052 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | 本发明涉及一种发酵虫草菌粉及其制剂中多糖含量的检测方法,该检测方法具有检测灵敏度高,重现性好等特点。该方法,具体包括以下步骤:(1)对照品溶液的制备精密称取适量单糖,加入超纯水溶解,衍生,即得混合对照品溶液;(2)供试品溶液的制备称取发酵虫草菌粉适量,通过水提醇沉法得到粗多糖,经酸水解、PMP衍生得供试品溶液;(3)相对较正因子的计算取步骤(1)制备的混合对照品溶液,计算葡萄糖与甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖间的相对校正因子;(4)供试品溶液的含量测定取步骤(2)制备的供试品溶液,通过高效液相色谱检测各单糖峰面积,使用相对校正因子计算有效成分的含量。 | ||
搜索关键词: | 供试品溶液 制备 发酵虫草菌粉 对照品溶液 相对校正因子 称取 单糖 检测 高效液相色谱检测 葡萄糖 半乳糖醛酸 检测灵敏度 葡萄糖醛酸 水提醇沉法 阿拉伯糖 含量测定 半乳糖 超纯水 粗多糖 甘露糖 酸水解 岩藻糖 重现性 木糖 精密 溶解 | ||
【主权项】:
1.一种发酵虫草菌粉及其制剂中多糖含量的检测方法,包括以下步骤:(1)对照品溶液的制备精密称取适量单糖对照品置于同一容量瓶中,加入超纯水溶解并稀释至刻度,取单糖溶液适量经过PMP衍生,即得混合对照品溶液;(2)供试品溶液的制备称取发酵虫草菌粉适量,通过水提醇沉法得到粗多糖,再加入Sevage试剂除去蛋白后冷冻干燥,得到发酵虫草菌粉多糖,取多糖适量,经酸水解、PMP衍生后即得供试品溶液;(3)相对较正因子fkm的计算取步骤(1)制备的混合对照品溶液,分别进样5、10、15、20、25、30μL,通过高效液相色谱检测峰面积,以葡萄糖为内标物,分别计算葡萄糖与甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖间的相对校正因子fkm;(4)供试品溶液的含量测定取步骤(2)制备的供试品溶液,通过高效液相色谱检测各单糖峰面积,使用相对校正因子计算甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖的含量,相对校正因子计算公式为:Wm=Wk×Am/fkm×Ak,Ak为葡萄糖内标物峰面积,Wk为葡萄糖内标物质量;Am为被测组分m的峰面积,Wm为被测组分m的质量,fkm为甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖的校正因子。
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