[发明专利]一种人Y染色体微缺失检测试剂盒及其应用

摘要

本发明提供了一种人Y染色体微缺失的多重PCR扩增系统和检测试剂盒，所述系统包含以下位点相应序列为SEQ ID No.1至SEQ ID No.40的扩增引物，15个Y染色体微缺失位点(AZFa区4个，AZFb区4个，AZFc区5个，AZFd区2个)、3个样本分子标签位点(X‑STR2个，常染色体In/del位点1个)以及2个性别质控位点(SRY，ZFX/Y)，15个Y染色体微缺失位点采用序列标签位点(STS)特异性引物，3个分子标签位点采用长度多态性引物，2个性别质控位点采用STS特异性引物(EAA/EMQN关于Y染色体微缺失实验室最佳指南推荐检测位点，2013)，本发明所提供的这些引物相互兼容能够在同一PCR扩增体系内进行反应；此外本发明还提供了包含含有扩增引物组合物容器、PCR反应母液容器、PCR辅助液容器的检测试剂盒及其在人Y染色体微缺失非诊断检测中的应用；本发明在DNA提取情况后，通过一个PCR反应对20个遗传标记位点目的片段同时扩增，可显著节省成本、人力和时间，提高工作效率。

主权项

一种人Y染色体微缺失检测的多重PCR扩增系统，其特征在于，所述扩增系统包括下组位点对应的PCR扩增引物：位点sY84，相应引物序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2；位点sY86，相应引物序列为SEQ ID No.3和SEQ ID No.4；位点sY182，相应引物序列为SEQ ID No.5和SEQ ID No.6；位点sY81，相应引物序列为SEQ ID No.7和SEQ ID No.8；位点sY121，相应引物序列为SEQ ID No.9和SEQ ID No.10；位点sY134，相应引物序列为SEQ ID No.11和SEQ ID No.12；位点sY127，相应引物序列为SEQ ID No.13和SEQ ID No.14；位点sY105，相应引物序列为SEQ ID No.15和SEQ ID No.16；位点sY255，相应引物序列为SEQ ID No.17和SEQ ID No.18；位点sY254，相应引物序列为SEQ ID No.19和SEQ ID No.20；位点sY242，相应引物序列为SEQ ID No.21和SEQ ID No.22；位点sY154，相应引物序列为SEQ ID No.23和SEQ ID No.24；位点sY1291，相应引物序列为SEQ ID No.25和SEQ ID No.26；位点sY145，相应引物序列为SEQ ID No.27和SEQ ID No.28；位点sY152，相应引物序列为SEQ ID No.29和SEQ ID No.30；位点DEFB126，相应引物序列为SEQ ID No.31和SEQ ID No.32；位点DXS7132，相应引物序列为SEQ ID No.33和SEQ ID No.34；位点DXS6809，相应引物序列为SEQ ID No.35和SEQ ID No.36；位点sY14，相应引物序列为SEQ ID No.37和SEQ ID No.38；位点ZFX/Y，相应引物序列为SEQ ID No.39和SEQ ID No.40；其中SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.6、SEQ ID No.8、SEQ ID No.9、SEQ ID No.12、SEQ ID No.13、SEQ ID No.15、SEQ ID No.18、SEQ ID No.19、SEQ ID No.21、SEQ ID No.24、SEQ ID No.26、SEQ ID No.28、SEQ ID No.30、SEQ ID No.31、SEQ ID No.33、SEQ ID No.35、SEQ ID No.38和SEQ ID No.39采用FAM荧光素标记。