[发明专利]产肠毒素性大肠杆菌耐热肠毒素基因SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒在审

专利信息
申请号: 201810209586.0 申请日: 2018-03-14
公开(公告)号: CN108179211A 公开(公告)日: 2018-06-19
发明(设计)人: 姜玲玲;杨莉;杨丽娟;唐远江;卢昱希;徐景娥;史开志;余波 申请(专利权)人: 贵州省畜牧兽医研究所
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/19
代理公司: 贵阳睿腾知识产权代理有限公司 52114 代理人: 谷庆红
地址: 550005 贵*** 国省代码: 贵州;52
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摘要: 发明公开了一种产肠毒素性大肠杆菌耐热肠毒素基因SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒,涉及试剂盒技术领域。本发明包括40μL特异性引物、250μL荧光定量PCR反应混合液(Premix Ex Taq)、20μL ROX Reference Dye、20μL阴性对照、20μL阳性对照、500μL超纯水;根据GenBank中猪源产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)耐热肠毒素(STⅡ)基因序列,设计1对特异性引物,进行试验,试验方法灵敏度可达1.0×101拷贝/μL,重复性好,将PCR产物测序结果与GenBank中的ST基因序列比对,相似度为98.2%~100%。本发明试剂盒具有检测速度快、检出率高的特点。
搜索关键词: 大肠杆菌 耐热肠毒素 产肠毒素 荧光定量PCR 特异性引物 诊断试剂盒 基因序列 荧光定量PCR反应 发明试剂 阳性对照 阴性对照 灵敏度 基因 超纯水 混合液 检出率 试剂盒 相似度 试验 比对 测序 拷贝 猪源 检测
【主权项】:
1.一种产肠毒素性大肠杆菌耐热肠毒素基因SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒,其特征在于,包括40μL特异性引物、250μL荧光定量PCR反应混合液(Premix Ex Taq)、20μL ROX Reference Dye、20μL阴性对照、20μL阳性对照、500μL超纯水;其中,特异性引物包括上游引物和下游引物,上游引物为5’,‑TATCAATAGCATTCAGCACCAT‑3’,下游引物为5’,‑AATGTCCGTCTTGCGTTAGGA‑3’。
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