[发明专利]一种具有穗发芽抗性的小麦分子育种方法

摘要

本发明公开了一种具有穗发芽抗性的小麦分子育种方法，涉及小麦育种技术领域。包括以下步骤，(1)以穗发芽抗性品种万县白麦VplB基因序列为模板在GenBanK中Blast，获得含有VplB基因及VplB基因上游序列的BAC序列；(2)以VplB基因上游序列的BAC序列为模板设计引物Bi‑TF和Bi‑TR，并分离小麦VplB基因上游2232bp的启动子；(3)采用5’缺失的方法构建瞬时表达载体。本发明通过具有穗发芽抗性的万县白麦VplB基因来构建基因植物表达载体，并通过农杆菌介导法来转化小麦，从而使得小麦具有穗发芽抗性，有效减轻了小麦穗发芽造成的经济损失，提高了小麦的产量和质量。

主权项

1.一种具有穗发芽抗性的小麦分子育种方法，其特征在于：包括以下步骤，(1)以穗发芽抗性品种万县白麦VplB基因序列为模板在GenBanK中Blast，获得含有VplB基因及VplB基因上游序列的BAC序列；(2)以VplB基因上游序列的BAC序列为模板设计引物Bi-TF和Bi-TR，并分离小麦VplB基因上游2232bp的启动子；(3)采用5’缺失的方法构建瞬时表达载体，将分离的缺失片段用HindIII和BamHI酶切后，与相同酶切后的pBI121载体片段连接，用于构建基因植物表达载体；(4)采用Gateway方法构建农杆菌介导的植物表达载体；(5)将植物表达载体分别与辅助载体PAL154均匀混合后，采用电击法转入农杆菌AGL1，并通过农杆菌介导法转化小麦；(6)观察记录小麦收获前的穗发芽状况。