[发明专利]冢村氏菌的环介导等温扩增检测方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201810041140.1 | 申请日： | 2018-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN108330200B | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 王心静;曹彦;杨栗坤 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三0九医院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人： | 牛艳玲 |
| 地址： | 100091 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种冢村氏菌环介导等温扩增快速检测方法，本发明针对冢村氏菌16s rDNA基因保守序列的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温65℃左右，几十分钟即可实现核酸的高效扩增；4条引物对靶序列的6个特异序列区域的识别，保证了LAMP扩增的高度特异性；LAMP不需要模板的热变性，长时间温度循环，在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的浪费，使反应速度可提高30‑50％；反应结束后，可直接通过肉眼观察反应管颜色变化，或通过凝胶电泳判断检测结果；该技术对冢村氏菌的检测特异性强，具有快速、高效、仪器要求简易、操作简便，成本低，易于在基层推广使用的特点。同时，本发明首次设计、筛选到冢村氏菌LAMP检测引物，并建立了冢村氏菌LAMP检测方法，填补了国内外在此检测领域的空白。 | ||
| 搜索关键词： | 扩增 引物 环介导等温扩增检测 链置换DNA聚合酶 保守序列 等温扩增 等温条件 检测结果 检测领域 快速检测 凝胶电泳 区域设计 特异性强 特异序列 特异引物 温度循环 颜色变化 仪器要求 反应管 热变性 试剂盒 对靶 核酸 介导 菌环 简易 筛选 填补 检测 基层 保证 | ||
【主权项】：
1.一种检测冢村氏菌的LAMP检测用引物，其特征在于，所述LAMP检测引物为：F3：5’‑GCCTGGGAAACTGGGTCTA‑3’B3：5’‑TGCCTCCCGTAGGAGTCT‑3’FIP：5’‑CAACAAGCTGATAGGCCGCGGTTCTCCTGCATGGGGGTTGGTGGAAAGC‑3’BIP：5’‑ATGGCCTACCAAGGCGACGATCTCAGTCCCAGTGTGGC‑3’。
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