[发明专利]冢村氏菌的环介导等温扩增检测方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201810041140.1 | 申请日： | 2018-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN108330200B | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 王心静;曹彦;杨栗坤 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三0九医院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人： | 牛艳玲 |
| 地址： | 100091 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 扩增 引物 环介导等温扩增检测 链置换DNA聚合酶 保守序列 等温扩增 等温条件 检测结果 检测领域 快速检测 凝胶电泳 区域设计 特异性强 特异序列 特异引物 温度循环 颜色变化 仪器要求 反应管 热变性 试剂盒 对靶 核酸 介导 菌环 简易 筛选 填补 检测 基层 保证 | ||
1.一种检测冢村氏菌的LAMP检测用引物，其特征在于，所述LAMP检测引物为：
F3：5’-GCCTGGGAAACTGGGTCTA-3’
B3：5’-TGCCTCCCGTAGGAGTCT-3’
FIP：5’-CAACAAGCTGATAGGCCGCGGTTCTCCTGCATGGGGGTTGGTGGAAAGC-3’
BIP：5’-ATGGCCTACCAAGGCGACGATCTCAGTCCCAGTGTGGC-3’。
2.一种检测冢村氏菌的LAMP检测方法，其特征在于，使用权利要求1所述的LAMP检测用引物进行LAMP扩增，所述检测方法是用于非疾病诊断目的的检测方法。
3.根据权利要求2所述的一种检测冢村氏菌的LAMP检测方法，其特征在于，环介导等温扩增的反应体系为：5pM的外引物F3和B3各1μL；40pM的内引物FIP和BIP各1μL；2×反应缓冲液12.5μL；1μL的BstDNA聚合酶；荧光染料1μL；1μL的模板DNA，加灭菌纯化水至25μL体系。
4.根据权利要求3所述的一种检测冢村氏菌的LAMP检测方法，其特征在于，所述LAMP检测反应条件为：65℃恒温60min。
5.根据权利要求2-4任意一项所述的一种检测冢村氏菌的LAMP检测方法，其特征在于，检测结果可直接通过肉眼观察反应管中颜色变化，或通过琼脂糖电泳观察梯形条带来判定检测结果。
6.一种冢村氏菌的LAMP检测试剂盒，其特征在于，所述冢村氏菌的LAMP检测试剂盒中包含有权利要求1所述的LAMP检测用引物。
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