[发明专利]一种细胞核的提取方法在审
| 申请号： | 201810004997.6 | 申请日： | 2018-01-03 |
| 公开（公告）号： | CN109988745A | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 张雪梅;王文伟;祁晓燕;张静 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物医学技术领域，涉及一种细胞核提取的方法，尤其是从离体的犬心室肌和分离的犬心室心肌细胞中分离细胞溶质、膜和核级分的方法，本发明的方法包括步骤：步骤一、获得离体的犬心肌细胞，步骤二、亚细胞分馏。本方法有助于获取到大量可用于基础研究及临床应用的人功能性细胞核；能安全有效地实现对特定类型人类细胞的筛选和富集，使所获细胞具备更好的生物安全性；本发明全面地检测了所分离细胞核的生物学特征和功能，为所述细胞核分离的研究和应用提供了可靠的数据，为其他新型细胞的细胞核提取评估提供了一套可供参考的方法体系。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞核 细胞核提取 离体 生物医学技术 心室心肌细胞 分离细胞核 生物安全性 生物学特征 研究和应用 有效地实现 方法体系 分离细胞 基础研究 临床应用 人类细胞 新型细胞 心肌细胞 心室肌 亚细胞 分馏 富集 核级 可用 溶质 筛选 细胞 参考 检测 评估 安全 | ||
【主权项】：
1.一种细胞核提取的方法，其特征在于，该方法为，从离体的实验动物心脏心肌和心室肌细胞样本中分离和提取细胞核，其包括选择性地采用渗透质膜分离与甾醇相互作用的强心苷和洋地黄苷，透化后，使用Dounce匀浆器，然后通过差示蔗糖密度梯度离心，通过机械粉粹从剩余的细胞器体中释放细胞核，获得核富集部分。
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