[发明专利]环状DNA的扩增方法有效
| 申请号： | 201780034209.1 | 申请日： | 2017-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN109415718B | 公开（公告）日： | 2022-09-27 |
| 发明（设计）人： | 末次正幸;辻本宽子;篠原赳 | 申请（专利权）人： | 奥利希罗基因组学有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12P19/34 |
| 代理公司： | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人： | 郑天松 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明提供可在无细胞系统中简便并且指数扩增环状DNA、特别是长链环状DNA的方法。具体而言，提供环状DNA的扩增方法，其包括使有复制起始序列(origin of chromosome(oriC))的环状DNA与含以下的酶组反应：(1)催化环状DNA的复制的第一酶组；(2)催化冈崎片段连接反应而合成形成环连体的2个姊妹环状DNA的第二酶组；及(3)催化2个姊妹环状DNA的分离反应的第三酶组，以及缓冲液、NTP、dNTP、镁离子源、及碱金属离子源的反应液混合而生成的反应混合物。 | ||
| 搜索关键词： | 环状 dna 扩增 方法 | ||
【主权项】：
1.环状DNA的扩增方法，其包括以下的工序：(1)形成成为模板的环状DNA和含以下物质的反应液的反应混合物的工序：催化环状DNA的复制的第一酶组；催化冈崎片段连接反应而合成形成环连体的2个姊妹环状DNA的第二酶组；催化2个姊妹环状DNA的分离反应的第三酶组；缓冲液；ATP；GTP、CTP及UTP；dNTP；镁离子源；及碱金属离子源；其中所述环状DNA含能与有DnaA活性的酶结合的复制起始序列(origin of chromosome(oriC))；及(2)将在工序(1)中形成的反应混合物在等温条件下保温的工序。
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