[发明专利]判断PCR结果是否为假阳性的方法有效
| 申请号： | 201711498072.3 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108085371B | 公开（公告）日： | 2021-11-02 |
| 发明（设计）人： | 李阳 | 申请（专利权）人： | 武汉艾德士生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6848 | 分类号： | C12Q1/6848 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 董建林;徐瑛 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开一种判断PCR结果是否为假阳性的方法，先估算出在PCR体系内将要加入的目标基因模板分子数量；然后根据目标基因模板分子数量向PCR体系内添加内参模板，所述内参模板的分子数量控制在目标基因模板分子数量的1/n；所述内参模板和目标基因模板高度同源，使得PCR引物能够以相同效率扩增内参模板和目标基因模板，然后对扩增结果进行测序分析；当扩增结果以目标基因片段为主，说明样品为阳性；当扩增结果以内参模板为主，则说明样品为阴性。本发明根据目标基因模板分子数量加入适量的内参模板，一方面能够压制污染信号，其抗污染能力可以达到Southern blot的级别，另一方面，本发明通过简单的PCR技术就可以对转基因阳性进行鉴定，可信度高，成本低廉。 | ||
| 搜索关键词： | 判断 pcr 结果 是否 阳性 方法 | ||
【主权项】：
1.判断PCR结果是否为假阳性的方法，其特征在于，先估算出如果在目标基因存在的情况下，在PCR体系内将要加入的目标基因模板分子数量；然后根据目标基因模板分子数量向PCR体系内添加内参模板，所述内参模板的加入用于压制污染，所述内参模板的分子数量控制在目标基因模板分子数量的1/n，n为2～1000的自然数；所述内参模板和目标基因模板高度同源，两者只有个别碱基的差别，使得PCR引物能够以相同效率扩增内参模板和目标基因模板，然后对扩增结果进行测序分析；当扩增结果以目标基因片段为主，说明样品为阳性；当扩增结果以内参模板为主，则说明样品为阴性；当阴性样品被目标模板污染，且污染量不超过预期目标模板数量的1/n，则得到的为可信结果。
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