[发明专利]促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法有效
申请号: | 201711377034.2 | 申请日: | 2017-12-19 |
公开(公告)号: | CN107991368B | 公开(公告)日: | 2019-07-12 |
发明(设计)人: | 张钦;邓新宇;王笑非 | 申请(专利权)人: | 广东省生物资源应用研究所;佛山安普泽生物医药股份有限公司 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 郝文婷;刘明星 |
地址: | 510260 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法,其是使用BIO‑RAD 111型电泳仪进行等电聚焦电泳,其中,每5mL制胶配方包括:25wt%丙烯酰胺单体溶液1mL、10.5M尿素3.33mL、60wt%蔗糖0.412mL、40wt%pH 2~4两性电解质溶液0.183mL、40wt%pH 3~10的两性电解质溶液0.075mL,最后加入预先混合的催化剂溶液0.1wt%FMN‑Na 25μl+10wt%AP7.5μl+TEMED 1.5μl;加样前先预电泳:200V,10min;电泳程序:第一阶段50V,30min;第二阶段100V,60min;第三阶段200V,30min;第四阶段450V,60min;第五阶段590V,直到电流为0。本发明方法可以将促红细胞生成素的不同等电点的电荷异构体分离开来,且对上限电压要求不高,不需要设备附加冷却装置。 | ||
搜索关键词: | 红细胞 生成 聚焦 电泳 方法 | ||
【主权项】:
1.促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法,其特征在于,其是使用BIO‑RAD 111型电泳仪进行等电聚焦电泳,其中,每5mL制胶配方包括:25wt%丙烯酰胺单体溶液1mL、10.5M尿素3.33mL、60wt%蔗糖0.412mL、40wt%pH 2~4两性电解质溶液0.183mL、40wt%pH 3~10的两性电解质溶液0.075mL,最后加入预先混合的催化剂溶液0.1wt%FMN‑Na 25μl+10wt%AP 7.5μl+TEMED 1.5μl;加样前先预电泳:200V,10min;电泳程序:第一阶段50V,30min;第二阶段100V,60min;第三阶段200V,30min;第四阶段450V,60min;第五阶段590V,直到电流为0。
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