[发明专利]促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法有效
申请号: | 201711377034.2 | 申请日: | 2017-12-19 |
公开(公告)号: | CN107991368B | 公开(公告)日: | 2019-07-12 |
发明(设计)人: | 张钦;邓新宇;王笑非 | 申请(专利权)人: | 广东省生物资源应用研究所;佛山安普泽生物医药股份有限公司 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 郝文婷;刘明星 |
地址: | 510260 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红细胞 生成 聚焦 电泳 方法 | ||
1.促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法,其特征在于,其是使用BIO-RAD 111型电泳仪进行等电聚焦电泳,其中,
每5mL制胶配方包括:25wt%丙烯酰胺单体溶液1mL、10.5M尿素3.33mL、60wt%蔗糖0.412mL、40wt%pH 2~4两性电解质溶液0.183mL、40wt%pH 3~10的两性电解质溶液0.075mL,最后加入预先混合的催化剂溶液0.1wt%FMN-Na 25μl+10wt%AP 7.5μl+TEMED1.5μl;
加样前先预电泳:200V,10min;
电泳程序:第一阶段50V,30min;第二阶段100V,60min;第三阶段200V,30min;第四阶段450V,60min;第五阶段590V,直到电流为0。
2.根据权利要求1所述的促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法,其特征在于,所述等电聚焦电泳的染色时间至少为120min。
3.根据权利要求1所述的促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法,其特征在于,所述促红细胞生成素为等电点在2~6范围内的促红细胞生成素。
4.根据权利要求1所述的促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法,其特征在于,正极液为1mol/L磷酸溶液,负极液为1mol/L氢氧化钠溶液。
5.根据权利要求1所述的促红细胞生成素的等电聚焦电泳方法,其特征在于,所述制胶后在4W的LED光下聚合1小时30分钟。
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