[发明专利]一种小麦成熟籽粒总蛋白双向电泳方法有效
| 申请号： | 201711351314.6 | 申请日： | 2017-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN108195918B | 公开（公告）日： | 2020-12-25 |
| 发明（设计）人： | 周正富;雷振生;吴政卿;田保明;江雪;秦毛毛;位芳;晁岳恩;刘聪聪;何盛莲;王美芳;李文旭;杨攀;常阳;王亚欢;徐福新 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院小麦研究所;郑州大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 时立新 |
| 地址： | 450000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种针对小麦成熟籽粒总蛋白的双向电泳方法，属于生物技术领域。该方法包括小麦成熟籽粒总蛋白提取、第一向等电聚焦、第二向SDS‑PAGE电泳、考马斯亮蓝染色、图像扫描与分析等步骤。本申请对小麦成熟籽粒总蛋白的双向电泳体系进行了优化分析，结果表明：用直接提取法提取小麦成熟籽粒蛋白、使用17cm的pH=5‑8的IPG预制胶条、上样量为500μg时，可获得蛋白点多、蛋白点分辨率高、图像清晰且重复性好的双向电泳图谱，是一套适用于小麦成熟籽粒总蛋白分析的双向电泳方法。通过该双向电泳体系的建立，可为小麦籽粒蛋白质组、小麦品质相关基因分离、优质小麦品种培育等相关研究提供相应的技术支撑。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小麦 成熟 籽粒 蛋白 双向 电泳 方法 | ||
【主权项】：
1.一种小麦成熟籽粒总蛋白双向电泳方法，其特征在于，该方法具体包括如下步骤：（1）采用TCA‑丙酮法或直接提取法提取小麦成熟籽粒总蛋白；（2）第一向等电聚焦；将步骤（1）中所提取小麦成熟籽粒总蛋白进行第一向等电聚焦，采用17cm的 IPG预制胶条时，胶条pH=5~8，蛋白上样量设置为250~750μg；（3）将步骤（2）中等电聚焦后胶条进行平衡后，进行第二向SDS‑PAGE电泳；（4）对步骤（3）中电泳结束后胶条采用考马斯亮蓝进行染色；（5）图像扫描与分析；对步骤（4）中染色后电泳胶条进行扫描获得电泳图谱，并进行分析。
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