[发明专利]一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法在审
| 申请号： | 201711235686.2 | 申请日： | 2017-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN108048448A | 公开（公告）日： | 2018-05-18 |
| 发明（设计）人： | 戎均康;刘晓;曹跃芬 | 申请（专利权）人： | 浙江农林大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 沈渊琪 |
| 地址： | 311300 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法，其包括以下步骤：经PCR获得含有目的片段的混合DNA产物；通过聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳将混合物中的不同DNA分子分开；核酸染料DNAgreen染色PAGE胶片；在紫外灯下切割下含有目的片段凝胶部分，用研磨棒将凝胶研磨至稀泥状；在凝胶中加入TE溶液，加热处理；混合物离心处理，保留上清液；使用实验室现有的普通的PCR产物纯化试剂盒从上清液中回收获得含有目的片段的溶液；将以上溶液直接作为PCR模板，扩增产物直接测序，获得目的DNA分子的序列信息。本发明具有以下优点：快捷方便；成本低；安全；质量高；效果好；资源整合利用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 pcr 混合 产物 分离 回收 大小 差异 微小 核酸 分子 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法，其特征在于包括以下步骤：1）经PCR 获得含有目的片段的混合DNA产物；2）通过聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳将混合物中的不同DNA分子分开；3）核酸染料 DNAgreen染色PAGE胶片；4）在紫外灯下切割下含有目的片段凝胶部分，置于EP管中，用研磨棒将凝胶研磨至稀泥状；5）以1克：1ml的比例在步骤4）的凝胶中加入TE溶液，加热处理；6）将步骤5）的混合物离心处理，保留上清液；7）使用实验室现有的普通的PCR产物纯化试剂盒从上清液中回收获得含有目的片段的溶液；8）将以上溶液直接作为PCR模板，扩增产物直接测序，获得目的DNA分子的序列信息。
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