[发明专利]一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法

权利要求书

1.一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）经PCR 获得含有目的片段的混合DNA产物；

2）通过聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳将混合物中的不同DNA分子分开；

3）核酸染料 DNAgreen染色PAGE胶片；

4）在紫外灯下切割下含有目的片段凝胶部分，置于EP管中，用研磨棒将凝胶研磨至稀泥状；

5）以1克：1ml的比例在步骤4）的凝胶中加入TE溶液，加热处理；

6）将步骤5）的混合物离心处理，保留上清液；

7）使用实验室现有的普通的PCR产物纯化试剂盒从上清液中回收获得含有目的片段的溶液；

8）将以上溶液直接作为PCR模板，扩增产物直接测序，获得目的DNA分子的序列信息。

2.如权利要求1所述的一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法，其特征在于所述的步骤2）中聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%-12%。

3.如权利要求1所述的一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法，其特征在于所述的步骤3）中浸泡10分钟。

4.如权利要求1所述的一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法，其特征在于所述的步骤5）中加热处理条件为：50℃加热30min。

5.如权利要求1所述的一种从PCR混合产物中分离回收大小差异微小的核酸分子的方法，其特征在于所述的步骤6）中离心条件为：12000 rpm离心1min。