[发明专利]一种抗瓜类枯萎病活性产物基因的克隆与序列分析方法有效
| 申请号： | 201710757205.8 | 申请日： | 2017-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN107400675B | 公开（公告）日： | 2021-01-26 |
| 发明（设计）人： | 赵志祥;严婉荣;肖敏;陈绵才;曾向萍 | 申请（专利权）人： | 海南省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12N15/54 | 分类号： | C12N15/54;C12N15/10;C12N15/75;C12Q1/18;C12R1/125 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 黄耀钧 |
| 地址： | 571100 *** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明属于瓜类枯萎病防治技术领域，公开了一种抗瓜类枯萎病活性产物基因的克隆与序列分析方法，包括：异位裂解法提取土壤微生物基因组DNA；宏基因组Fosmid文库构建及其质量检测；筛选宏基因组Fosmid表达文库，获得Fosmid活性克隆；活性物质的提纯和鉴定，确定活性物质结构，验证化合物抗瓜类枯萎病的活性；筛选和改造植物内生菌株，将基因转化到改造后的内生菌株，通过选择不同的启动子、不同的培养基和发酵条件，建立抗瓜类枯萎病药物基因的高效表达体系。本发明将分离、筛选和改造植株内生菌作为表达株系，建立从文库中筛选出来的有生物学活性的目的基因异源高效表达体系。为实现抗枯萎病药物的商品化奠定坚实的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗瓜类 枯萎病 活性 产物 基因 克隆 序列 分析 方法 | ||
【主权项】：
一种抗瓜类枯萎病活性产物基因的克隆与序列分析方法，其特征在于，所述抗瓜类枯萎病活性产物基因的克隆与序列分析方法包括：(1)异位裂解法提取土壤微生物基因组DNA；(2)宏基因组Fosmid文库构建及其质量检测；(3)筛选宏基因组Fosmid表达文库，获得Fosmid活性克隆；(4)活性物质的提纯和鉴定，确定活性物质结构，验证化合物抗瓜类枯萎病的活性；(5)筛选和改造植物内生菌株，将基因转化到改造后的内生菌株，通过选择不同的启动子、不同的培养基和发酵条件，建立抗瓜类枯萎病药物基因的高效表达体系。
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