[发明专利]一种环状探针和基于环状探针捕获的测序文库构建方法在审

专利信息
申请号: 201710576708.5 申请日: 2017-07-14
公开(公告)号: CN109252224A 公开(公告)日: 2019-01-22
发明(设计)人: 萧卓;刘华勇;袁剑颖;石先灯;李英镇 申请(专利权)人: 深圳华大基因股份有限公司
主分类号: C40B50/06 分类号: C40B50/06;C12N15/11
代理公司: 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 代理人: 孙银行;彭家恩
地址: 518083 广东省深圳市盐田*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种环状探针和基于环状探针捕获的测序文库构建方法,该方法包括:将环状探针与靶标核酸退火杂交,其中环状探针为线性核酸探针,其包括两个末端的特异性臂区和中间的通用序列,其中特异性臂区用于与靶标核酸杂交,杂交后探针的两个末端首尾相向,通用序列用于连接两个末端的特异性臂区并作为通用引物的识别区域;在聚合酶和连接酶的作用下,使环状探针的3’末端以靶标核酸为模板进行扩增并与5’末端连接形成环状分子;加入核酸外切酶将线性核酸分子消化。本发明利用扩增原理,解决捕获效率低和成本高昂的问题,利用环状探针解决引物对数量有限的问题,利用通用引物扩增解决多重扩增均一性差的问题。
搜索关键词: 环状探针 靶标核酸 扩增 捕获 测序文库 通用序列 通用引物 杂交 构建 探针 线性核酸分子 退火 核酸外切酶 多重扩增 环状分子 末端连接 线性核酸 聚合酶 均一性 连接酶 首尾 相向 引物 消化
【主权项】:
1.一种基于环状探针捕获的测序文库构建方法,其特征在于,所述方法包括:将环状探针与靶标核酸退火杂交,其中所述环状探针为线性核酸探针,其包括两个末端的特异性臂区和中间的通用序列,其中所述特异性臂区用于与所述靶标核酸杂交,杂交后探针的两个末端首尾相向,所述通用序列用于连接两个末端的特异性臂区并作为通用引物的识别区域;在聚合酶和连接酶的作用下,使所述环状探针的3’末端以所述靶标核酸为模板进行扩增并与5’末端连接形成环状分子;和加入核酸外切酶将线性核酸分子消化。
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