[发明专利]提高EGFR基因19外显子缺失突变检测特异性的方法及应用在审
申请号: | 201710569035.0 | 申请日: | 2017-07-13 |
公开(公告)号: | CN107904289A | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
发明(设计)人: | 宋岩岩;王平存;田振华;于源华;姜金兰;张晓;张昊 | 申请(专利权)人: | 长春理工大学 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858 |
代理公司: | 长春众益专利商标事务所(普通合伙)22211 | 代理人: | 纪尚 |
地址: | 130022 吉林省长春市*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 一种提高EGFR基因19外显子缺失突变检测特异性的方法及应用,属于微生物检测技术领域,其方法是特异性扩增EGFR基因19缺失突变位点区域的前引物和后引物,所述的前引物末端与野生型不匹配而与突变型匹配,本引物末端多出2个错配位点,并在第4位人为的再引入一个错配,有效的防止野生型对检测的影响。该特异性前引物和后引物一起扩增包含基因突变位点在内的扩增产物的长度为50‑200bp;特异性针对扩增产物的taqman探针,其Tm高于引物9‑12℃,所述的探针携带能检测的荧光标记。有益效果是通过采用改进型ARMS引物,建立了ARMS法和taqman探针法相结合的方法,大大增加了19外显子检测的特异性。具有灵敏度高特异性好的特点,适合高通量,微量样本的检测。 | ||
搜索关键词: | 提高 egfr 基因 19 外显子 缺失 突变 检测 特异性 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种提高EGFR基因19外显子缺失突变检测特异性的方法,其方法是:特异性扩增EGFR基因19缺失突变位点区域的前引物和后引物,所述的前引物末端与野生型不匹配而与突变型匹配,特别的与常规的ARMS引物相比,本引物末端多出2个错配位点,并在第4位人为的再引入一个错配,大大提高了其特异性,有效的防止野生型对检测的影响。该特异性前引物和后引物一起扩增包含基因突变位点在内的扩增产物的长度为50‑200bp;特异性针对扩增产物的taqman探针,其Tm高于引物9‑12℃,所述的探针携带能检测的荧光标记。
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