[发明专利]一种预布微、纳米级籽晶蛋白质结晶板的制备方法

摘要

本发明提供了一种预布微、纳米级籽晶蛋白质结晶板的制备方法，首先获得蛋白质晶体并利用交联方式制得微、纳米级交联蛋白质籽晶储存液，其次将粘合剂均匀涂布于蛋白结晶板的结晶孔中，在粘合剂上散布微、纳米级交联蛋白质晶体，最后置于恒温干燥箱中干燥处理，即可获得预布微、纳米级交联蛋白质晶体作为籽晶、用于提高蛋白质结晶成功率的新型结晶板。本发明能够在保证结晶条件筛选的优势的同时，彻底解决籽晶稳定性、使用方便性等问题。

主权项

1.一种预布微、纳米级籽晶蛋白质结晶板的制备方法，其特征在于包括下述步骤：第一步，配制溶解蛋白质所需的缓冲液；称取蛋白质溶解于蛋白质缓冲液中制得蛋白质溶液；吸取蛋白质溶液和沉淀剂溶液均匀混合滴入蛋白结晶板的结晶孔中；密封蛋白结晶板，并将结晶板置于4‑20℃环境中结晶；第二步，把蛋白质晶体从蛋白结晶板的结晶孔中转移到交联剂中进行交联；交联实验体系放置于4‑16℃环境中，反应过程不断搅拌，12‑24小时后制得微、纳米级籽晶储存液；第三步，配制 体积比为0.1～2％的醋酸溶液作为高分子聚合物壳聚糖、聚乙烯醇的溶剂；称取高分子聚合物，加入到醋酸溶液中，40‑60℃下搅拌5‑24小时，配制成质量体积比为0.1～1％的高分子聚合物粘合剂；第四步，用去离子水洗涤蛋白结晶板三次，并置于40‑80℃加热烘干；将0.1～1％的高分子聚合物粘合剂均匀的涂布于蛋白结晶板上，形成一层0.1～0.5μm厚度均匀的透明高分子聚合物粘合膜；将蛋白结晶板放置在超净台中风干1～10分钟；第五步，在每个结晶孔的高分子聚合物粘合膜上散布微、纳米级交联籽晶的悬浮液；将蛋白结晶板恒温干燥，直至蛋白结晶板上溶液完全干燥，即获得预布微、纳米级交联蛋白质晶体作为籽晶、用于提高蛋白质结晶成功率的结晶板。