[发明专利]一种还原自组装蛋白质包裹磁性微球的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种还原自组装蛋白质包裹磁性微球的制备方法。该方法利用巯基乙醇、二硫苏糖醇或者3‑巯基‑1,2‑丙二醇作为还原剂，通过还原反应打开蛋白质的二硫键，使蛋白质暴露出巯基和疏水区域，与磁性纳米颗粒通过巯基配位以及疏水作用自组装形成核壳结构的蛋白质包裹磁性微球。本发明制备的蛋白质包裹微球粒径易调控，稳定性、水溶性好，不易聚集，非特异性吸附小，具有优异的生物相容性，无需使用特殊设备、耗时短、易操作、生产成本低廉，制备条件温和，在制备过程中直接固定特异性抗体，得到偶联抗体的蛋白质包裹磁性微球活性高，可很好的应用于磁性免疫层析中。

主权项

一种还原自组装蛋白质包裹磁性微球的制备方法，其特征在于，该方法按如下步骤进行:(1)将油溶性纳米颗粒溶解于有机相中，再加入水相，预混，加入蛋白质混合后得到粗乳液；(2)向步骤(1)中得到的粗乳液中加入巯基还原剂，通过还原反应，打开蛋白质分子中的二硫键，使蛋白质暴露出巯基和疏水区域，蛋白质通过巯基配位和疏水作用与磁性纳米颗粒自组装形成核壳结构的蛋白质包裹磁性微球反应液；(3)向步骤(2)中所得到的反应液中加入0～4℃的缓冲液终止还原反应，用磁铁将蛋白质包裹的磁性微球吸附在试管底部，倒去上清，加入缓冲液进行涡旋清洗后，倒去上清，得到纯化的蛋白质包裹磁性微球。