[发明专利]一种高效率的基因编辑方法在审
| 申请号： | 201710342876.8 | 申请日： | 2017-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN108866100A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 杨辉 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N9/22 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200031 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种高效率的基因编辑方法。揭示了一种对细胞基因组进行定向基因编辑方法──同源介导的末端接合法(HMEJ)。本发明所述的HMEJ方法，利用带有单个向导RNA靶向位点和长同源臂的供体构建物，可实现精确的基因编辑，且基因编辑效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 高效率 细胞基因组 定向基因 构建物 同源臂 供体 介导 位点 同源 合法 | ||
【主权项】：
1.一种对细胞基因组进行定向基因编辑方法，其特征在于，所述方法包括：(1)提供供体构建物，该构建物依次包括：sgRNA靶向序列1，5’同源臂，基因操作序列，3’同源臂，sgRNA靶向序列2；其中，5’同源臂与3’同源臂分别与细胞基因组的待编辑基因区域两端的不小于200bp的序列互补；其中，所述的基因操作序列是用于对细胞基因组的待编辑基因区域进行改造的序列；(2)以(1)的构建物作为供体，以靶向于细胞基因组的待编辑基因区域的sgRNA切割细胞基因组的待编辑基因区域，以靶向于sgRNA靶向序列1的sgRNA、靶向于sgRNA靶向序列2的sgRNA分别切割sgRNA靶向序列1和sgRNA靶向序列2，通过CRISPR/Cas9方法对细胞基因组进行基因编辑。
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