[发明专利]一种检测植物根际促生细菌在根系定殖的方法有效
申请号: | 201710332234.X | 申请日: | 2017-05-12 |
公开(公告)号: | CN107058458B | 公开(公告)日: | 2020-11-24 |
发明(设计)人: | 邱立友;申朝会;高玉千;李涛;黄涛;田芳 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06;C12N1/20;C12R1/40 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 时立新;杨海霞 |
地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明涉及一种检测植物根际促生细菌在根系定殖的方法,其包括如下步骤:1)小麦转接及液体培养:将在固体培养基中培养的小麦苗转接于液体MS培养基中,在白天25‑28℃、光照16 h,夜间15‑20℃、黑暗条件下,于水平摇床上20‑50 rmp培养24‑48 h,然后添加1‑3 ml菌悬液,再继续培养5‑10天;2)小麦根系定殖细菌数量计数:取出小麦苗,用无菌滤纸将根部的培养基擦去,称重;然后置于组织研磨器中,添加2 ml 1×PBS缓冲液,研磨至浆状,采用LB固体培养基进行梯度稀释平板计数,计算每克鲜重小麦根的菌落形成单位数。本发明方法在无菌环境下液体震荡培养,培养条件稳定可控,取样方法标准统一。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 植物 根际促生 细菌 根系 方法 | ||
【主权项】:
一种检测植物根际促生细菌在根系定殖的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)小麦转接及液体培养:将在固体培养基中培养的小麦苗转接于液体MS培养基中,在白天25‑28℃、光照16 h,夜间15‑20℃、黑暗条件下,于水平摇床上20‑50 rmp培养24‑48h,然后添加1‑3 ml菌悬液,再继续培养5‑10天;2)小麦根系定殖细菌数量计数:取出小麦苗,用无菌滤纸将根部的培养基擦去,称重;然后置于组织研磨器中,添加2 ml 1×PBS缓冲液,研磨至浆状,采用LB固体培养基进行梯度稀释平板计数,计算每克鲜重小麦根的菌落形成单位数。
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