[发明专利]棉花黄萎病原菌遗传多样性的研究方法

摘要

本发明是关于一种棉花黄萎病原菌遗传多样性的研究方法，其步骤包括1)分离病原菌将棉花黄萎病病株的棉秆用乙醇擦拭，剥皮，除去剥皮后的头端后，截成小段，埋入第一培养基，得到孢子和菌丝；2)单孢分离纯化用接种环刮取所述的孢子和菌丝，和无菌水混合，得到孢子和菌丝悬浮液；取孢子和菌丝悬浮液在第二培养基划线，得到菌落；用接种针挑取单菌落点到第三培养基中，得到直径5‑8cm的菌落；3)真菌DNA提取取所述第三培养基上的培养物于离心管，吹干，加入磁珠，在液氮中冷冻后，震荡研磨，提取DNA，并用凝胶电泳检测提取质量；4)建立ISSR体系。本发明大大缩短了棉花黄萎病病原菌分离纯化时间；ISSR体系减少，扩增的条带仍然多态性高、特异性强、背景清晰，并节约成本。

主权项

一种棉花黄萎病原菌遗传多样性的研究方法，其特征在于，其步骤包括:1)分离病原菌：将棉花黄萎病病株的棉秆用乙醇擦拭，剥皮，除去剥皮后的头端后，截成小段，埋入第一培养基，得到孢子和菌丝；2)单孢分离纯化：用接种环刮取所述的孢子和菌丝，和无菌水混合，得到孢子和菌丝悬浮液；取孢子和菌丝悬浮液在第二培养基划线，得到菌落；用接种针挑取单菌落点到第三培养基中，得到直径5‑8cm的菌落；3)真菌DNA提取：取所述第三培养基上的培养物于离心管，吹干，加入磁珠，在液氮中冷冻后，震荡研磨，提取DNA，并用凝胶电泳检测提取质量；4)建立ISSR体系。