[发明专利]可溶性透明质酸酶的大规模生产在审

专利信息
申请号: 201710102946.2 申请日: 2009-03-06
公开(公告)号: CN106906196A 公开(公告)日: 2017-06-30
发明(设计)人: D·贝克;L·布克班德 申请(专利权)人: 哈洛齐梅公司
主分类号: C12N9/26 分类号: C12N9/26
代理公司: 永新专利商标代理有限公司72002 代理人: 左路,林晓红
地址: 美国加利*** 国省代码: 暂无信息
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明提供用于制备大规模的可溶性透明质酸酶制备品的方法。该方法利用含有多个活性拷贝的编码可溶性透明质酸酶的核酸的细胞,以及利用多种加料和温度的变化,由此经编码的可溶性透明质酸酶被分泌到细胞培养基中。
搜索关键词: 可溶性 透明质酸酶 大规模 生产
【主权项】:
一种收获的细胞培养液,包含所收获的具有大于5000单位/mL酶活性的可溶性重组人PH20,其中所收获的细胞培养液是指从细胞、细胞碎片和集合物分离的液体,其未进行进一步纯化或浓缩。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于哈洛齐梅公司,未经哈洛齐梅公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201710102946.2/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种大麦β-淀粉酶提取工艺-201910663834.3
  • 单守水;刘苹;于飞;张毅 - 烟台麦特尔生物技术有限公司
  • 2019-07-23 - 2019-11-12 - C12N9/26
  • 本发明公开一种大麦β‑淀粉酶提取工艺,包括原料调浆,酶解浸提,板框过滤,板框清洗,液体超滤,酶液换热,酶液除杂,酶液精滤,酶液稳定等。还可以包括料渣酶解,料液过滤,滤液浓缩和糖化料渣处理。原料浆液搅拌升温过程中添加中温α‑淀粉酶、β‑葡聚糖酶和中性蛋白酶,可以水解原料中的大分子物质,提高目标大麦β‑淀粉酶的释放,原料利用率高,提高产品收率;产品为植物提取获得,不含转基因成分,产品纯度高;产品稳定性好,室温保存12个月酶活保存率达97%以上;可经过酶解用于生产麦芽汁产品,用于酿造、食品、发酵等行业。生产麦芽汁后的滤渣用作发酵饲料,整个生产过程环保无污染,废渣得到充分利用。
  • 一种耐酸性α-淀粉酶菌株的生产方法-201910771796.3
  • 杨兆兰;吴义珑 - 杨兆兰
  • 2019-08-21 - 2019-11-05 - C12N9/26
  • 本发明属于生物工程技术领域,具体的说是一种耐酸性α‑淀粉酶菌株的生产方法,该生产方法采用的板框过滤机包括机架、滑轨、控制箱、油缸和供油单元;机架一端固连有供油单元;机架远离供油单元的一侧通过一对滑轨固连有固定板;滑轨上滑动连接有一组滤板;滑轨上滑动连接有压紧板;滤板一侧开设有凹槽,凹槽内设有滤布,相邻滤板上的凹槽内的滤布合并形成过滤腔;过滤腔中悬挂有一组钢球;高压的高酶活发酵液经进料管和补浆孔流入过滤腔进行过滤;本发明通过高酶活发酵液流入过滤腔中冲击钢球,使得钢球在过滤腔中不断摆动减缓高酶活发酵液中的絮凝物的沉积速度,进而减少絮凝物阻塞滤布。
  • 用于高浓度淀粉液化的a-淀粉酶突变体及其编码基因和它们的应用-201910213538.3
  • 佟毅;李义;陶进;陈博;王小艳 - 中粮集团有限公司;吉林中粮生化有限公司
  • 2019-03-20 - 2019-10-18 - C12N9/26
  • 本发明属于酶工程和基因工程领域,公开了用于高浓度淀粉液化的a‑淀粉酶突变体及其编码基因和它们的应用。所述a‑淀粉酶突变体具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列;或具有在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的基础上经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且酶活性不变的由SEQ ID NO:2衍生的氨基酸序列。本发明的人工合成a‑淀粉酶突变体可在pH4.5‑6.0、温度60‑110℃和无钙离子液化体系下,对高浓度淀粉乳初始浓度进行高效稳定的水解,达到高浓度淀粉液化工艺迅速降粘的要求。同时,减少钙离子的添加更有利于实现产品的下游加工应用。
  • 一种热稳定性提高的β-淀粉酶突变体-201710544429.0
  • 吴敬;陈晟;陈磊 - 江南大学
  • 2017-07-06 - 2019-09-03 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种热稳定性提高的β‑淀粉酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)来源的β‑淀粉酶进行定向进化的研究,利用进化最常用的方法之一易错PCR技术对亲本β‑淀粉酶进行热稳定性的筛选,最终得到了一株热稳定性显著提高的β‑淀粉酶突变体。本发明突变体Thr461Tyr/Asp506Asn/Asp519Lys在55℃下的半衰期比野生型β‑淀粉酶提高了2倍,在55‑65℃范围内始终保持较高的酶活力。本发明得到的突变体比野生型β‑淀粉酶更加适用于淀粉糖的工业应用。
  • 一种基于AzMMMan化学修饰的蛋白制备方法-201910337973.7
  • 刘小文 - 诸暨德齐生物科技有限公司
  • 2019-04-25 - 2019-08-16 - C12N9/26
  • 本发明涉及蛋白质药物技术领域,尤其是一种基于AzMMMan化学修饰的蛋白制备方法,包括以下步骤;步骤一:AzMMMan化学修饰蛋白和其与相关分子点击化学交联的制备;步骤二:利用AzMMMan化学修饰Protein A得到Protein A‑AzM‑DBCO‑X;利用AzMMMan化学修饰Protein B得到Protein B‑AzM‑DBCO‑Y;本发明通过AzMMMan化学修饰的蛋白与其他药物分子点击化学反应交联结合形成纳米颗粒,不仅延长其血液循环时间,而且因EPR效应靶向至肿瘤组织,在酸性条件下可逆释放出蛋白,保留活性,协同治疗,与传统PEG化蛋白类药物来延长半衰期但生物活性大大降低相比,此法可在酸性条件下可逆释放出蛋白药物,保留其生物活性,且该策略可以用做所有体内环境下不稳定或者体内办衰期不够长的药物蛋白的剂型改进。
  • 人脐带华通胶组织消化酶及其制备方法-201910214305.5
  • 朱迪·德瓦库玛;焦阳;王铁;杨丽华;李靖 - 江苏瑞思坦生物科技有限公司
  • 2019-03-20 - 2019-06-21 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种人脐带华通胶组织消化酶及其制备方法,以重量百分比计算,含有以下原料:透明质酸酶16.0~23.5%、DNA酶0.16~0.23%、胶原酶3.2~4.7%、DMEM46.9~63.9%、庆大霉素0.8~1.2%、青霉素G钠盐16.0~23.5%。将透明质酸酶、DNA酶、胶原酶溶于DMEM后,用0.22μm滤器过滤,后加入庆大霉素和青霉素G钠盐,于‑20℃冰箱冻存。通过上述方式,本发明能够对脐带华通胶组织进行高效酶解,快速得到脐带华通胶间充质干细胞,且能够有效的防止细胞污染,生物学效应显著,具有广阔的应用前景。
  • α-葡萄糖苷酶及同步糖化转苷制备低聚异麦芽糖的方法-201610461264.6
  • 牛丹丹 - 福州大学
  • 2016-06-23 - 2019-06-04 - C12N9/26
  • 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及一种α‑葡萄糖苷酶及同步糖化转苷制备低聚异麦芽糖的方法。所述α‑葡萄糖苷酶在66℃下的半衰期t1/2提高了3.7倍,采用所述α‑葡萄糖苷酶与耐高温α‑淀粉酶、中温α‑淀粉酶、β‑淀粉酶、普鲁兰酶进行淀粉液化和同步糖化转苷所制备的低聚异麦芽糖核心组成(IG2+P+IG3)占干物质的比例达到52%~59%。
  • 一种外切-α-1;4-糖苷酶与其编码基因和应用-201610146913.3
  • 张桂敏;汪声晨;蒋思婧;马延和 - 湖北大学
  • 2016-03-15 - 2019-05-24 - C12N9/26
  • 本发明涉及一种外切‑α‑1,4‑糖苷酶,该蛋白质具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;或该蛋白质具有在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上缺失、置换、插入或添加一个至几个氨基酸的衍生序列并且该蛋白质具有外切淀粉酶活性。本发明所述的外切‑α‑1,4‑糖苷酶具有高酶活、pH耐受性好等优点,可以广泛应用于α‑1,4‑糖苷键的酶解,尤其对于支链淀粉的底物特异性比较好。
  • 具备透明质酸酶活性的靶向融合蛋白、制备方法及用途-201810935968.1
  • 胡适;傅文燕 - 沣潮医药科技(上海)有限公司
  • 2018-08-16 - 2019-03-29 - C12N9/26
  • 本发明提供了具备透明质酸酶活性的靶向融合蛋白、制备方法及应用,该融合蛋白为包含ABC三条肽链的三聚体,A肽链为透明质酸酶融合肽链,B肽链为IgG抗体重链突变体,C肽链为IgG抗体轻链或轻链突变体。A肽链结构通式为γ1‑γ3或者γ1‑γ2‑γ3,γ1为透明质酸酶类似物,包括HYALl基因、HYAL2基因或PH20/SPAM1基因表达序列;γ2为肽接头;γ3为人IgG抗体Fc区hole突变体或knob突变体,hole突变体和knob突变体形成特异性二聚体。当Fc区不保留铰链区时,采用肽接头,透明质酸酶类似物C末端残基直接融合至肽接头N末端残基,其C末端残基直接融合至hole突变体或knob突变体的N末端;当Fc区保留部分或全部铰链区时,不采用肽接头,透明质酸酶类似物的C末端残基直接融合至hole突变体或knob突变体的N末端。
  • 一种提高烟叶提取物中淀粉酶酶活的提取方法-201811346040.6
  • 翟妞;徐国云;周会娜;陈千思;张慧;刘萍萍;郑庆霞;许亚龙;王晨;李晶;卢鹏 - 中国烟草总公司郑州烟草研究院
  • 2018-11-13 - 2019-02-12 - C12N9/26
  • 本申请属于烟草代谢物技术领域,具体涉及一种提高烟叶提取物中淀粉酶(AMS)酶活提取方法专利申请事宜。该方法针对新鲜烟叶中淀粉酶的提取,具体包括:制备提取液(采用裂解液RIPA、缓冲液NEB或PBS)、烟叶预处理、溶液法提取等步骤。初步测定结果表明,经过相关提取工艺参数优化后,提取液中淀粉酶(AMS)酶活得到了较好提高,可达9.7×10‑4U/μg全蛋白,较好达到了减少杂质蛋白干扰、提升AMS酶含量的目的。同时由于相关提取方法简单快速、耗时较短(仅1.5 h左右),因此使得本申请具有较好的科研价值,可为AMS活性分析及其它相关蛋白分析和研究奠定技术基础。
  • 一种鼠李糖苷酶的生产方法-201511024430.8
  • 陈龙;王双平 - 宁夏乙征生物工程有限公司
  • 2015-12-31 - 2019-01-18 - C12N9/26
  • 本发明提供了一种鼠李糖苷酶的生产方法,包括以下步骤:(1)取细丽毛壳菌种接种于一级种子培养基中,培养得一级种子液;(2)将一级种子液接种于二级种子培养基中,培养得二级种子液;(3)将二级种子液接种于发酵培养基中,得到混合培养基,后添加蔗糖,流加鼠李糖,得到酶活达到500U/mL以上的发酵液;(4)将发酵液进行过滤,对滤液超滤浓缩,得到酶活达到1250U/mL以上的鼠李糖苷酶酶液;(5)将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体,进行喷雾干燥,得到酶活达到3500U/mL以上的固体鼠李糖苷酶。上述鼠李糖苷酶的生产方法,工艺简单、操作容易、生产效率高,且生产的鼠李糖苷酶活力高,稳定性好,易于储存。
  • 高酶活发酵液的培养方法及提取耐酸α-淀粉酶的方法-201810660778.3
  • 荣东;徐冲;卢一飞;褚伟立;张晓华;程福宝 - 安徽新熙盟生物科技有限公司
  • 2018-06-25 - 2018-11-16 - C12N9/26
  • 本发明涉及一种高酶活发酵液的培养方法及提取耐酸α‑淀粉酶的方法,所述高酶活发酵液的培养方法中,通过优化一级种子培养和发酵培养的培养基配比、调高培养温度、控制溶氧、增加补料工艺,充分满足了菌株生长代谢需要,创造了一个更有利于菌株生长的微环境。最终制备的高酶活发酵液中提取的耐酸α‑淀粉酶的酶活达到75000‑80000U/mL,较一般酶活25000U/mL成倍提高,且耐酸性更好,pH应用范围为4.5‑6,同时大幅降低了发酵原辅材料生产成本,使得该酶的推广应用有了更广阔的空间,具有极大的社会和经济价值。
  • 对淀粉聚合物具有增强的活性的变体α淀粉酶-201380029784.4
  • R·R·博特;L·G·卡斯康-佩雷拉;D·A·埃斯特尔;M·科尔克曼;D·E·维尔德斯 - 丹尼斯科美国公司
  • 2013-05-24 - 2018-10-23 - C12N9/26
  • 本发明描述了用于诸如淀粉液化的工业过程的α‑淀粉酶的变体。所述α‑淀粉酶变体具有增强的比活性,从而允许在液化过程中更快地降低峰值粘度。所述α‑淀粉酶通过向亲本家族13α‑淀粉酶多肽的氨基酸序列在淀粉结合槽中的氨基酸残基处引入突变而改性;其中所述淀粉结合槽通过A结构域中在第一条β‑链之前的α‑螺旋中的氨基酸残基、A结构域中第六个α‑螺旋与第七条β‑链之间的环、A结构域中第七个α‑螺旋与第八条β‑链之间的环,以及连接A结构域和C结构域的环形成;并且其中与所述亲本α淀粉酶多肽相比所述突变改变淀粉与所述变体α淀粉酶多肽的结合。
  • α-淀粉酶的液体制剂-201680072983.7
  • Y·韩 - 巴斯夫酶有限责任公司
  • 2016-12-16 - 2018-08-21 - C12N9/26
  • 本公开书涉及含有一种或多种α‑淀粉酶的液体酶制剂,其用于淀粉处理,其中酶制剂的pH是大约pH 6.0‑8.0,以及应用所述液体酶制剂的方法。本公开书还涉及制备具有提高的稳定性的含有一种或多种α‑淀粉酶的液体酶制剂的方法,该方法包括将液体酶制剂的pH滴定至pH 6.0‑8.0的范围。
  • 一种玻璃酸酶精品的提取方法-201810210160.7
  • 孙源远;汪雅雯;黄臻辉;丁金国;刘弘忍;周辉 - 上海上药第一生化药业有限公司
  • 2018-03-14 - 2018-06-22 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种玻璃酸酶精品的提取方法。该提取方法包括下列步骤:(1)在0‑10℃下将玻璃酸酶粗品与水混合,调节pH4.0‑5.0;(2)将(1)得到的溶液用水进行透析;(3)在0‑10℃下将(2)得到的透析液离心得上清液,依次加入磷酸三钠水溶液和乙酸钙水溶液,调节pH8.0‑9.0;将得到的溶液在0‑10℃下离心,取上清液与活性炭混合;将得到的溶液在0‑10℃下离心得上清液,依次加入磷酸三钠水溶液和乙酸钙水溶液,调节pH8.0‑9.0;(4)将(3)得到的溶液进行抽滤,调节pH6.0‑8.0后进行过滤取滤液,再用纳米膜过滤。本发明得到的玻璃酸酶的效价和稳定性更高,更加符合生物制品的质量标准。
  • 一种用于提取果胶的原果胶酶制备方法-201611102319.0
  • 张玲;陈忠永 - 漳州市皓康生物科技有限公司
  • 2016-12-05 - 2018-06-12 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种用于提取果胶的原果胶酶制备方法,包括以下步骤:1)富集:取1~5g柑橘园土样加入装有50~100ml富集培养基的三角瓶中;2)筛选:取富集后的培养液多份,将稀释后不同浓度的菌悬液分别涂布于初筛平板上;从初筛平板上挑取形态不同的菌落,在PDA斜面培养基中划线,做好记号,进行保种;从斜面上挑取孢子或菌丝接种到不同的发酵培养基中,摇瓶发酵,取发酵液,测定发酵液中的原果胶酶酶活,筛选出酶活最高的菌株;3)酶液制备:将筛出的菌株接种至优化培养基中,取所得的培养物,离心处理,得到的上清液即为原果胶酶液,采用本发明制备的复合酶液进行果胶提取,果胶几乎没有降解,能够降低环境污染。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top