[发明专利]一种染色质免疫共沉淀样品快速制备方法有效
| 申请号： | 201710086482.0 | 申请日： | 2017-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN106801096B | 公开（公告）日： | 2019-11-12 |
| 发明（设计）人： | 杜海宁;李锋;王洪岩;郑亮德;舒文杰;洪斌;李俊峰 | 申请（专利权）人： | 阿卡斯特（武汉）生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 董建林 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市东湖新技术开发*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种染色质免疫共沉淀样品快速制备方法，包括：对细胞进行甲醛交联，固定蛋白与核酸的复合物，将蛋白核酸复合物抽提出来，再将染色质片段通过超声或酶解打断成小片段；将抗体挂到固相支持物磁珠上，再将获得的小片段加到制好的磁珠上孵育，获得磁珠抗原抗体复合物，孵育完成后将未结合物质洗去，对磁珠抗原抗体复合物进行重悬，获得待检测的磁珠抗原抗体复合物样品。本发明方法操作简单，制备得到的磁珠复合物样品可直接用于PCR检测或者扩增，构建DNA文库，样品制备时间明显缩短，同时还避免了由于过多洗脱步骤造成的某些蛋白质与DNA富集信号较弱的缺陷，大大提高了检测的灵敏度，且对后续的PCR鉴定和DNA片段扩增不会产生任何不良影响。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 染色质 免疫 共沉淀 样品 快速 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种染色质免疫共沉淀样品快速制备方法，包括：对细胞进行甲醛交联，固定蛋白与核酸的复合物，将蛋白核酸复合物抽提出来，再将染色质片段通过超声或酶解打断成小片段；将抗体挂到固相支持物磁珠上，再将获得的小片段加到制好的磁珠上孵育，获得磁珠抗原抗体复合物，孵育完成后将未结合物质洗去，其特征在于，对磁珠抗原抗体复合物进行重悬，获得待检测的磁珠抗原抗体复合物样品；所述磁珠的初始添加量≤10μl。
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