[发明专利]一种快速检测牛奶中支原体的方法

摘要

本发明提供一种快速检测牛奶中支原体的方法，涉及牛奶中微生物检测技术领域；首先向牛奶中加入DNA提取裂解液，对DNA进行快速提取裂解，然后加入脂肪分离液，将脂肪分离，离心后取上清液得处理奶样；向处理奶样中加支原体反应检测液，水浴处理后，加入支原体检测显色液，观察颜色变化；该方法通过快速从牛奶中提取DNA，减少了常规方法复杂耗时的步骤，借助LAMP技术，不需要使用特殊仪器，因此节约成本，降低检测难度，整个过程在1h内即可完成，极大的提高了检测效率，为治疗支原体感染疾病和阻止支原体进一步扩散赢得了时间。

主权项

一种快速检测牛奶中支原体的方法，其特征在于，步骤如下：(1)从奶牛场采集牛奶样，摇匀，取0.2ml放到1.5ml离心管中；(2)向奶样中加入0.8ml DNA提取裂解液，充分混合，静置5min，期间每间隔2min充分摇动一次；(3)继续向奶样中加入0.2ml脂肪分离液，充分摇匀，静置2min；(4)静置结束后，在10000r/min的转速下离心2min；(5)离心结束后，将上清液移到离心柱中，盖上盖，10000r/min离心2min后，弃去回收管及里面液体，将离心柱放于1.5ml的离心管中，向离心柱中加100uL蒸馏水，10000r/min离心1min；(6)在反应管中加入12.5uL支原体检测反应液，然后加入2uL步骤(5)处理后的奶样，最后加入10.5uL蒸馏水，充分混合；(7)将反应管放于63℃水浴锅中保温50min；(8)保温结束后，加入2uL支原体检测显色液，肉眼观察或借助紫外灯观察颜色变化，用肉眼观察时，溶液为黄色说明牛奶中存在支原体，橙色说明没有支原体；用紫外灯观察时，溶液为亮黄色说明牛奶中存在支原体，暗棕色说明没有支原体。