[发明专利]一种利用血糖仪高灵敏定量检测黄曲霉毒素B1的方法

摘要

本发明属于黄曲霉毒素B1的定量检测领域，公开了一种利用血糖仪定量检测黄曲霉毒素B1的方法，利用纳米金标记黄曲霉毒素的核酸适配体，通过黄曲霉毒素B1单克隆抗体、核酸适配体与目标物黄曲霉毒素B1结合，形成具有夹心式结构的单克隆抗体‑黄曲霉毒素B1‑检测探针复合物，具有更强的特异性，与待测物中的目标分子结合效果好，检测结果更加精确、定量检测范围更广，具有体积小、成本低、操作简单的特点。

主权项

一种利用血糖仪定量检测黄曲霉毒素B1的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：制备纳米金‑蔗糖酶‑核酸适配体检测探针复合物；步骤二：将黄曲霉毒素B1的单克隆抗体，4℃孵育12h；用缓冲液B冲洗；然后加入封闭缓冲液，室温封闭1h；用缓冲液A冲洗，完成黄曲霉毒素B1的单克隆抗体的固定；步骤三：向步骤二的黄曲霉毒素B1的单克隆抗体中加入不同浓度的黄曲霉毒素B1待测液，37℃孵育1h，使黄曲霉毒素B1与黄曲霉毒素B1的单克隆抗体进行特异性结合，用缓冲液A冲洗未与单克隆抗体结合的黄曲霉毒素B1，得到黄曲霉毒素B1与单克隆抗体的结合体；步骤四：在步骤三所得的结合体中加入步骤一制备的纳米金‑蔗糖酶‑核酸适配体检测探针复合物，37℃孵育2h，形成具有夹心式结构的单克隆抗体‑黄曲霉毒素B1‑检测探针复合物，未与结合体上的黄曲霉毒素B1结合的纳米金‑蔗糖酶‑核酸适配体检测探针复合物留在上层上清液中；步骤五：取步骤四的上清液，加入蔗糖溶液，37℃孵育30min后，用血糖仪进行定量检测。