[发明专利]一种利用基因敲除技术构建细菌缺陷株的试剂盒及方法在审
| 申请号： | 201710029839.1 | 申请日： | 2017-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN106591346A | 公开（公告）日： | 2017-04-26 |
| 发明（设计）人： | 卿志荣;郭帅;修朝阳;郑帮 | 申请（专利权）人： | 江苏睿玻生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 226000 江苏省南通市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用基因敲除技术构建细菌缺陷株的试剂盒及方法。其中试剂盒包括盒体、试剂A和试剂B。该试剂盒利用含有sgRNA、CRISPR/Cas9蛋白、ku蛋白与ligD蛋白的pCAG‑NHEJ载体，将质粒转化入目标细菌感受态，通过CRISPR/Cas9系统剪切细菌目的基因组DNA，从而实现基因组敲除，再利用NHEJ系统即可自动连接DNA断端，使细菌存活。本发明的优点在于可以简单、快速构建针对任何靶基因的pCAG‑NHEJ载体，并且无需人工引入与靶序列具有同源性的双链DNA修复DNA断端，从而简化CRISPR/Cas9技术的操作步骤。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 基因 技术 构建 细菌 缺陷 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
一种利用基因敲除技术构建细菌缺陷株的试剂盒及方法，其特征在于，所述试剂盒包括：用于快速敲除目的基因组DNA的载体pCAG‑NHEJ，用于载体构建的DH5α感受态细胞。
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