[发明专利]通过在昆虫细胞中扩增遗传密码来制备工程化蛋白质的手段和方法在审
| 申请号： | 201680069449.0 | 申请日： | 2016-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN108368499A | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | I·伯格;E·莱姆克;C·克勒;G·埃斯特拉达吉罗纳 | 申请（专利权）人： | 欧洲分子生物学实验室 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N9/00;C12N15/52;C12N15/63;C12N15/67;C12N15/85;C12P13/00 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 柴云峰;黄革生 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | 本发明涉及制备工程化靶多肽(TP)的方法，所述工程化靶多肽在其氨基酸序列中包含一个或多个相同或不同的非规范氨基酸(ncAA)残基，通过在昆虫细胞系(ICL)中表达所述TP并通过在所述ICL中表达新的正交细菌氨酰tRNA合成酶/tRNA对实现所述方法；适用于将所述正交tRNA合成酶/tRNA的遗传信息引入所述ILC的杆状病毒穿梭载体(杆粒)；用于在所述ILC中表达所述特定tRNA的特定表达盒；由所述方法获得的TP；以及制备所述TP的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 工程化 制备 靶多肽 合成酶 氨酰tRNA合成酶 氨基酸序列 昆虫细胞系 穿梭载体 杆状病毒 昆虫细胞 遗传密码 遗传信息 正交tRNA 表达盒 非规范 试剂盒 氨基酸 残基 杆粒 扩增 正交 蛋白质 细菌 引入 | ||
【主权项】：
1.一种制备在其氨基酸序列中包含一个或多个相同或不同的非规范氨基酸(ncAA)残基的靶多肽(TP)的方法，所述方法包括以下步骤：a)在所述一个或多个ncAA存在下，在昆虫细胞系(ICL)中表达所述TP，其中所述TP编码核苷酸序列(CSTP)包含编码所述一个或多个ncAA残基的一个或多个选择密码子；并以任何顺序并发或顺序进行b)在所述ICL中表达在所述TP的氨基酸序列中引入所述一个或多个ncAA残基所需的一种或多种正交细菌氨酰tRNA合成酶/tRNAncAA(O‑RS/O‑tRNAncAA)对，其中用于所述一种或多种细菌tRNAncAA(CStRNAncAA)的编码序列处于昆虫细胞来源的调控序列(RSIC)的控制下；和c)任选地回收表达的TP。
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