[发明专利]免疫突触的质量预测了嵌合抗原受体（CAR）T细胞的效能

摘要

本发明公开的实施例涉及嵌合抗原受体免疫细胞(如：T细胞)的效能测定方法。在具体的实施例中，通过成像测定了嵌合抗原受体和肿瘤抗原之间突触的结构、信号传导和功能性。由此测定了突触质量，并确定突触质量与特定嵌合抗原受体免疫细胞的效能是正相关的。

主权项

1.一种测定包含嵌合抗原受体(嵌合抗原受体)的免疫细胞效力的方法，包括以下步骤:(a)提供包含多个标记的肿瘤抗原的平面脂质双层；及将包含标记的肿瘤抗原的双层暴露于免疫细胞包含一种或多种靶向抗原的嵌合抗原受体，由此产生结合到抗原的嵌合抗原受体复合物；或者(b)提供表达标记抗原的肿瘤抗原阳性细胞；以及将所述细胞暴露于免疫细胞，所述免疫细胞包含一种或多种靶向所述细胞的嵌合抗原受体s抗原，从而产生与抗原结合的嵌合抗原受体复合物；及(c)执行以下一项或多项:(1)测定标记复合物在脂质双层中的分布；(2)测定脂质双层中标记复合物的强度；(3)测定嵌合抗原受体的T细胞受体的ζ链或参与T细胞活化的另一信号分子的磷酸化形式；(4)测定复合物中F‑肌动蛋白的积累；(5)测定复合物中穿孔素的极化；(6)测定复合物中ζ链相关蛋白70(pZAP70)的积累；(7)测定复合物中淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)的积累；(8)细胞增殖能力测定；及(9)肿瘤细胞杀伤活性测定。(10)体内肿瘤细胞杀伤试验(11)双光子显微镜下的体内免疫突触检测。