[发明专利]分泌抗小麦矮缩病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用有效
申请号: | 201611208960.2 | 申请日: | 2016-12-23 |
公开(公告)号: | CN106636009B | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
发明(设计)人: | 吴建祥;周雪平;张明皓 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/08;G01N33/577;G01N33/569 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 张法高;傅朝栋 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种分泌抗小麦矮缩病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用原核表达的小麦矮缩病(WDV)CP重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、筛选、克隆,获得1株能稳定传代并分泌抗WDV单抗的杂交瘤细胞株23F4,其保藏号为CGMCC No.13297。该杂交瘤细胞株分泌的单抗腹水间接ELISA效价达到10‑9,抗体类型及亚类为IgG1、kappa链。该单抗与WDV外壳蛋白有特异性反应。利用23F4单抗为核心建立检测小麦植物中WDV的ACP‑ELISA和dot‑ELISA方法,这两种方法检测病叶的灵敏度分别达到1:163 840和1:5 120倍稀释(w/v,g/mL)。该杂交瘤细胞株及其单抗的获得和血清学检测方法的建立为该病毒病的检测、诊断及科学防控提供了物质和技术支撑。 | ||
搜索关键词: | 单抗 杂交瘤细胞株 分泌 小麦 检测 间接ELISA效价 病毒 传代 特异性反应 血清学检测 保藏 技术支撑 抗体类型 抗原免疫 外壳蛋白 细胞融合 小麦植物 原核表达 重组蛋白 灵敏度 腹水 病叶 稀释 亚类 应用 克隆 筛选 诊断 | ||
【主权项】:
1.一种分泌抗小麦矮缩病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株23F4,其特征在于能分泌抗小麦矮缩病毒的特异性单抗,杂交瘤细胞株23F4于2016年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No. 13297。
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