[发明专利]一种用于植物基因组定点碱基替换的载体在审
| 申请号： | 201611180376.0 | 申请日： | 2016-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN106609282A | 公开（公告）日： | 2017-05-03 |
| 发明（设计）人： | 朱健康;陆钰明 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司31266 | 代理人： | 王正君,崔佳佳 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种用于植物基因组定点碱基替换的载体。具体地，本发明提供了一种具有特定结构的核酸构建物，以及利用该构建物在植物基因组的特定位点进行碱基突变或碱基替换的方法。本发明的方法可将C替换或突变为T或G，并且替换效率高达11.5％，并且在一个突变植株内，有高达60％的细胞发生了替换。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 植物 基因组 定点 碱基 替换 载体 | ||
【主权项】：
一种用于对植物进行基因编辑的核酸构建物，其特征在于，所述的核酸构建物包括：第一表达盒；第二表达盒；和任选的第三表达盒；其中，所述第一表达盒为用于表达gRNA的gRNA表达盒；所述第二表达盒为用于表达融合蛋白的融合蛋白表达盒，所述的融合蛋白具有式Ia或Ib结构：A‑L1‑B‑L2‑C (Ia)B‑L1‑A‑L2‑C (Ia)各式中，A为胞嘧啶脱氨基酶；L1为无或第一连接肽(如Xten)B为无切割活性的Cas9或仅具有单链切割活性的Cas9；L2为无或第二连接肽(如Xten)；C为无或Uracil DNA glycosylase inhibitor(UGI)；所述第三表达盒为用于表达筛选标记的筛选标记表达盒；并且，所述的第一表达盒、第二表达盒、和第三表达盒各自独立地位于相同或不同的载体上。
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