[发明专利]一种固液双相酶解与超滤联用制备超低分子量透明质酸寡糖及其盐的方法

摘要

本发明公开了一种固液双相酶解与超滤联用制备超低分子量透明质酸寡糖及其盐的方法，该方法利用芽孢杆菌产生的透明质酸酶降解透明质酸及其盐，采用固液双相酶解与超滤系统联用的方法制得高浓度透明质酸酶解液，进而通过灭活、活性炭吸附除杂、过滤、喷雾干燥得到分子量≤3kDa的超低分子量透明质酸寡糖及其盐。本发明所得产品稳定性好、分子量超低，抗炎、透皮吸收性好、纯度高、无细胞毒性、抗氧化能力强，具有皮肤细胞损伤修复等优点，可广泛应用在化妆品、食品及医药领域。该方法工艺流程操作简单，条件温和，不使用各种醇，能耗相对较低，对产品结构无破坏，无环境污染，适合大规模工业化生产。

主权项

1.一种固液双相酶解与超滤联用制备超低分子量透明质酸寡糖及其盐的方法，其特征是包括以下步骤：（1）酶解缓冲液准备：调节纯化水pH为4~9、温度为20~48℃，然后加入芽孢杆菌透明质酸酶，配成酶解缓冲液；（2）固液双相酶解：在搅拌下向酶解缓冲液中加入氧化锆分散珠，再快速加入高分子量的透明质酸或其盐固体至其质量体积浓度为5~25%，搅拌混匀，得到透明质酸‑酶解液固液双相酶解体系；在搅拌下酶解至至固液双相酶解体系转变为液液单相酶解体系后，再次快速加入高分子量的透明质酸或其盐固体至其质量体积浓度为5~25%，搅拌混匀形成透明质酸‑酶解液固液双相酶解体系，继续搅拌酶解，直至固液双相酶解体系转变为液液单相酶解体系；（3）超滤：酶解体系变为液液单相酶解体系时，将酶解反应液与超滤系统连接，边超滤边酶解，直至酶解反应液中的透明质酸或其盐的分子量≤3kDa，控制超滤条件使酶解结束时超滤滤出的清液体积为酶解反应液的40‑60%；（4）后处理：合并超滤滤出的清液和剩余的酶解反应液，进行灭活、活性炭吸附、过滤处理，过滤所得滤液进行喷雾干燥，得到分子量≤3kDa的超低分子量透明质酸寡糖及其盐。